[发明专利]一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法

权利要求书

1.一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法，其特征在于，可分为溶液配制、上样、淋洗、洗脱、HPLC分析五个步骤，具体步骤如下：

1)溶液配制：将含有姜黄素的原料配置成溶液，所选溶剂为甲醇或/和乙醇；溶液中溶剂含量不低于30％，配制溶液的浓度为0.1mg/mL～10mg/mL；

2)上样：将样品溶液滴加在SPE柱中填料的上表面即可或者利用AKTA purier纯化系统所进行的吸附工作，可以通过上样环上样或上样液直接通过纯化系统管路上样；

3)淋洗：淋洗液为水，淋洗液的添加单位为柱体积，淋洗液的流速为0.5mL/min～15mL/min；加入1～5个柱体积的水，将阴离子型离子交换琼脂糖填料中所有吸附较弱或者未吸附的物质冲淋下来，保证强吸附作用下的姜黄素分子与样品中其它杂质的分离；

4)洗脱：采用含有甲酸的甲醇溶液洗脱，解吸附；用紫外吸收的检测技术对于洗脱液中的姜黄素进行检测，一旦检测不到姜黄素的吸收，洗脱即可完成；同时，由于姜黄素本身在溶液中呈现出黄色，因此也可以使用肉眼判断是否洗脱结束；收集洗脱液，供HPLC分析；

5)HPLC分析：对流出液进行分析，收集姜黄素成分的产品溶液。

2.根据权利要求1所述一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法，其特征在于，步骤1)所述配制溶液的浓度为0.5mg/mL～2mg/mL。

3.根据权利要求1所述一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法，其特征在于，步骤2)上样过程进行之前，需要将阴离子型离子交换琼脂糖填料装填至一定体积的柱管之内，这一装填过程可以通过利用预装柱的方式省略；同时也可以通过利用SPE空柱管装填的方式进行，所述SPE空柱管的直径为5mm～800mm。

4.根据权利要求3所述一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法，其特征在于，所述SPE空柱管的直径为5mm～50mm。

5.根据权利要求3所述一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法，其特征在于，步骤2)中SPE空柱管所进行的吸附工作是在常压下完成的，其流速可以通过SPE柱管下端连结的泵，通过改变泵的功率来实现。

6.根据权利要求3所述一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法，其特征在于，步骤2)中利用预装柱进行的吸附工作在AKTA purier纯化系统中完成，其流速由软件通过纯化系统内部的泵进行控制，流速为0.5mL/min～15mL/min。

7.根据权利要求1所述一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法，其特征在于，步骤3)所述阴离子型离子交换琼脂糖填料为Bio-Works公司的琼脂糖填料，该产品命名为TREN。

8.根据权利要求1所述一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法，其特征在于，步骤4)所述甲酸的浓度为0.5％～5％，洗脱液的流速为0.5mL/min～15mL/min。

9.根据权利要求1所述一种采用阴离子型离子交换琼脂糖填料吸附姜黄素的方法，其特征在于，步骤5)所述HPLC分析条件如下：采用Unitary C18色谱柱，HPLC仪器为Waters2695-2998PDA Detector，检测波长为260nm，流速为1.0mL/min，柱温为35℃，进样体积为10μL，流动相为纯乙腈和3％的醋酸(50:50)。