[发明专利]李PsMYB18基因及其编码蛋白与应用

说明书

本发明属于植物分子生物学领域，具体涉及一种李PsMYB18基因及其编码蛋白与应用。所述李PsMYB18基因基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1；基因编码的氨基酸序列为SEQ ID NO:2；含有李PsMYB18基因的重组表达载体为pCAMBIA1302‑PsMYB18；含有李PsMYB18基因的基因工程菌为GV3101‑PsMYB18。将含有PsMYB18基因的工程菌菌液注射入烟草叶片中，可显著抑制花色苷合成激活因子的花色苷诱导作用。

技术领域

本发明属于植物分子生物学领域，具体涉及一种李PsMYB18基因及其编码蛋白与应用。

背景技术

李是蔷薇科李属植物，为多年生落叶果树，广泛分布于世界各国，是我国重要的传统果树之一，我国李栽培面积和产量均居世界首位。李果实富含类胡萝卜素、维生素和花色苷等生物活性物质，具有预防多种疾病的功效，深受消费者喜爱。

过去的数十年中，在国内外李育种家通过杂交、实生或芽变选种等传统手段获得了一大批优良的李品种。但随着人们生活水平的不断提高和消费习惯的改变，人们对李果实的要求呈现出多样化的需求，针对特定性状快速培育大量特色、多样的李新品种，成为推动产业转型升级与供给侧结构改革，不断满足消费者多样化需求的关键。

发明内容

本发明的目的在于提供一种李PsMYB18基因及其编码蛋白与应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

李PsMYB18基因，所述基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1。

所述基因编码的氨基酸序列为SEQ ID NO:2。

制备含有李PsMYB18基因的重组表达载体pCAMBIA1302-PsMYB18。

制备含有李PsMYB18基因的基因工程菌GV3101-PsMYB18。

进一步地，将李PsMYB18基因应用于基因工程育种培育李新品种中。

本发明的优点在于：

本发明提供一种来源于李的对花色苷合成有抑制作用的PsMYB18基因、编码蛋白及含有该基因的重组质粒和重组基因工程菌，本发明可应用于基因工程育种，用于培育花色苷含量改变的培育李新品种。

附图说明

图1为李PsMYB18基因对烟草叶片积累花色苷的影响。

具体实施方式

实施例1 李PsMYB18基因克隆

通过比较转录组学手段秋姬李’果皮中发现一个在秋姬李着色过程中表达量上升的基因，命名为PsMYB18。以红色‘秋姬李’果皮为材料进行RNA提取和cDNA合成。以特异引物对PsMYB18-F：ATGAGGAAACCCTGCTGCGATAAGC和

PsMYB18-R：CTTCCACCTGGACGATGAATATTC，进行PCR 扩增获得PsMYB18编码区序列。PCR反应体系为50μl，成分包括为：I-5TM2xHigh-Fidelity Master Mix 25μl，上下游引物(10μM)各2μl，cDNA 1μl，H₂O 20μl。PCR程序为：90℃预变性3min，35个 循环的98℃15s，56℃15s和72℃ 20s，72℃ 5min。

PsMYB18基因序列如下：