[发明专利]一种缩小模型的层析柱及其制备方法

说明书

本发明涉及抗体纯化技术领域，尤其是涉及一种缩小模型的层析柱及其制备方法。所述缩小模型的层析柱，包括层析柱体和填充于层析柱体内的层析填料，装柱液为乙醇的水溶液。采用乙醇的水溶液为装柱液，将层析填料装填于层析柱体。本发明采用乙醇的水溶液作为装柱液，能够有效缓解柱壁效应，经柱效测试合格，可得到适用于抗体纯化缩小模型的层析柱。本发明的层析柱的制备方法，操作简单，易于填装，无需缓冲液置换等繁琐步骤。

技术领域

本发明涉及抗体纯化技术领域，尤其是涉及一种缩小模型的层析柱及其制备方法。

背景技术

抗体生产工艺验证的目标是，证明其在已确定限度内操作时，能够生产出质量适当并持续稳定的抗体产品。由于抗体和其生产工艺的复杂性，只通过成品检验不能充分保证生产的持续稳定性。所以，必须对抗体生产工艺进行设计和验证，证明某工艺具有有效性和可重复性，并且其生产出的成品符合已确立的放行标准的要求。

在工艺验证中，建立一个使用实验室规模的模型来模拟商业化生产规模的缩小模型是非常有价值的。首先，在商业化规模下进行工艺验证研究是非常困难并且昂贵的，所以可以利用缩小模型进行工艺表征研究，开展重复使用的层析填料的寿命研究和执行探索性清洁验证研究。同时，小规模研究可以防止商业化生产系统受到清除研究中所用危险物质(杂质和病毒等)的污染。缩小规模实验可以被设计用于单个单元操作或用于整个工艺链，用以评价工艺步骤的稳健性。在缩小规模模型的建立中，从商业化规模到缩小规模模型的倍数非常关键，因为缩小模型太大则无法提供足够的物料，而缩小模型太小则无法反映实际的工艺性能。所以必须建立合适的缩小规模模型以满足工艺验证的使用需求。

在层析工艺缩小规模模型的建立中，缩小模型的层析介质应与商业化生产规模的层析介质相同，此外，所有重要的工艺参数应当保持不变，缩小模型的纯化水平应当尽可能代表商业化规模的工艺水平。对于层析设备、柱床高度、线性流速、保留时间、缓冲液、操作温度和上样的样品，都应当证明其能够代表商业化规模。为了保证有效性，规模缩小色谱柱中得到的产品回收率和纯度，应与实际生产色谱柱中获得的产品回收率和纯度一致。用于验证的指定的分离色谱柱的规模缩小程度，依赖于实际生产规模和能够可靠重复生产的最小规模。

对于层析工艺缩小模型，所采用缩小模型层析柱十分关键，一般有两种选择。一是采用预装柱，主要产品为Repligen公司的OPUS ValiChrom Column，一般可选择5、8和11.3mm直径的预装柱。预装柱使用方便，但是价格昂贵。另一种是采用空柱自己填装，主要产品为Millipore公司的Vantage系列层析柱(最小直径为11mm)，GE公司的Tricorn系列层析柱(最小直径为5mm)和XK或Hiscale系列层析柱(最小直径为16mm)。以上常用的实验室规模空层析柱，价格也很贵，且规格选择的余地不大，很难满足各层析工艺缩小模型的需要。传统的10mm及以下的层析柱的柱壁效应非常严重，普通的装柱液(纯化水或盐溶液)容易造成填料挂壁现象、导致装柱失败。同时，由于柱壁效应，正常的层析工艺流速很难将整根柱子压实，会导致柱头压的过紧而柱尾压的过松，导致装柱失败。

以上的这些不足限制了层析工艺缩小模型的建立及其在在特定的工艺验证中的应用。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种缩小模型的层析柱，以解决现有技术中存在的柱壁效应严重、成本高的技术问题。

本发明的第二目的在于提供一种缩小模型的层析柱的制备方法，易于填装，无需缓冲液置换等繁琐步骤。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种缩小模型的层析柱，包括层析柱体和填充于层析柱体内的层析填料，装柱液为乙醇的水溶液。

本发明采用乙醇的水溶液作为装柱液，能够有效缓解柱壁效应，经柱效测试合格，可得到适用于抗体纯化缩小模型的层析柱。