[发明专利]一种检测防腐保鲜剂的试剂盒制备在审
申请号: | 201811590102.8 | 申请日: | 2018-12-25 |
公开(公告)号: | CN111366718A | 公开(公告)日: | 2020-07-03 |
发明(设计)人: | 杜霞;洪霞;张淑雅 | 申请(专利权)人: | 南京亿特生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 212009 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 防腐 保鲜剂 试剂盒 制备 | ||
1.一种检测噻苯咪唑的时间分辨荧光免疫分析试剂盒,其特征在于:由多孔包被板,缓冲液,噻苯咪唑标准品,噻苯咪唑的抗体冻干品,铕标记的羊抗鼠抗体,洗涤液和增强液所组成。
2.一种根据权利要求1所述检测噻苯咪唑的时间分辨荧光免疫分析试剂盒的检测方法,包括免疫原、包被原和单克隆抗体的制备以及样品前处理,其特征在于:
将噻苯咪唑与牛血清白蛋白偶联,得到免疫原;
将噻苯咪唑与卵血清蛋白偶联,得到包被原;
(3)用步骤(1)的免疫原免疫小鼠,通过杂交瘤技术,得到分泌抗噻苯咪唑的单克隆抗体的杂交瘤细胞株;
(4)以体内诱生腹水法大量制备抗体,使用Protein G柱进行纯化,获得抗噻苯咪唑的单克隆抗体
用步骤(2)的包被原包被固相载体;
(6)将动物组织先经过酸解提取后,再过MAX柱净化,最后加入衍生试剂和催化剂进行处理,得到待测产物;
(7)将步骤(6)的待检物进行测量荧光强度cps,对照标准曲线计算样品中的噻苯咪唑含量。
3.根据权利要求1所述检测噻苯咪唑的时间荧光免疫分析法试剂盒的检测方法,其特征在于:所述的固相载体是多孔包被板,采用96孔的多微孔包被板作为固相载体。
4.根据权利要求1所述检测噻苯咪唑的时间荧光分辨免疫分析法试剂盒的检测方法,其特征在于:所述的衍生试剂是丁胺。
5.根据权利要求1所述检测噻苯咪唑的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒的检测方法,其特征在于:所述的催化剂是腈基磷酸二乙酯。
6.根据权利要求1所述检测噻苯咪唑的时间荧光免疫分析法试剂盒的检测方法,其特征在于:所述步骤(6)和(7)具体为取包被有噻苯咪唑-OVA的微孔包被板,加入50 µL处理好的样品到各自的微孔中,加入50 µL以缓冲液稀释的噻苯咪唑抗体,25~37℃振荡0.5~1小时,洗涤液洗三次,加以缓冲液稀释的100 µL Eu3+-羊抗鼠抗体,25~37℃振荡0.5~1小时,洗涤液洗六次,加200 µL增强液振荡5分钟后测量荧光强度cps,从标准曲线计算样品中的噻苯咪唑含量。
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