[发明专利]一种用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的工作电极及其酶生物传感器有效
申请号: | 201811589035.8 | 申请日: | 2018-12-25 |
公开(公告)号: | CN109507259B | 公开(公告)日: | 2021-09-14 |
发明(设计)人: | 张绫芷;王治潘 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327;G01N27/30;C12Q1/00 |
代理公司: | 上海智力专利商标事务所(普通合伙) 31105 | 代理人: | 周涛 |
地址: | 315201 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 次黄嘌呤 黄嘌呤 工作 电极 及其 生物 传感器 | ||
1.一种用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的工作电极的制备方法,其特征在于:
所述工作电极为其表面粘附了铜金属有机骨架材料的复合物的玻碳电极;
所述铜金属有机骨架材料的复合物为具有纳米纤维结构的铜金属有机骨架材料的表面孔隙中吸附了黄嘌呤氧化酶所形成的复合物;
所述具有纳米纤维结构的铜金属有机骨架材料,其比表面积的范围为30~80m2/g,其表面孔隙的孔径尺寸为1.7~50nm,其表面孔隙率为20~40%;
所述铜金属有机骨架材料的复合物通过海藻酸钠粘附于所述玻碳电极的表面;
所述制备方法包括以下步骤:
步骤1),制备所述铜金属有机骨架材料的复合物:将浓度为20~40mg/ml的黄嘌呤氧化酶溶液与浓度为0.8~3mg/ml的所述铜金属有机骨架材料的溶液以1:1~1:3的体积比进行充分混合,使得所述黄嘌呤氧化酶被吸附于所述铜金属有机纳米纤维材料的表面孔隙中;
步骤2),将步骤1)制备获得的所述铜金属有机骨架材料的复合物与浓度为0.1~0.3%wt海藻酸钠溶液,以2:1~4:1的体积比进行充分混合,获得处理溶液;
步骤3),将步骤2)获得的处理溶液以3~6μl/cm2滴于所述玻碳电极的表面,获得所述工作电极;其中,所述玻碳电极的氧化还原峰电位差小于100mV。
2.如权利要求1所述的用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的工作电极的制备方法,其特征在于:
在所述步骤1)中,将所述黄嘌呤氧化酶溶液与所述铜金属有机骨架材料的溶液在离心管中混合均匀后,再置于摇床中以100~300rpm/min的速度摇晃至少8h。
3.如权利要求1所述的用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的工作电极的制备方法,其特征在于:
在所述步骤2)中,将所述铜金属有机骨架材料的复合物与所述海藻酸钠溶液混合后,置于涡轮振荡器上以300~500rpm/min的速度振荡3~5分钟以充分混合。
4.如权利要求1所述的用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的工作电极的制备方法,其特征在于:
所述步骤3) 所用的玻碳电极在使用前经过了一个预处理的步骤,即将玻碳电极利用超声波清洗机清洗干净,再依次用0.5μm、0.3μm、0.05μm的氧化铝抛光粉打磨光亮,待氧化还原峰电位差小于100mV后,用去离子水清洗干净并用氮气吹干。
5.如权利要求1所述的用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的工作电极的制备方法,其特征在于:
所述制备方法还包括步骤4),将步骤3)获得的工作电极贮存于4℃、pH值为6.5~7.5的磷酸缓冲液中至少8h以上,再使用。
6.如权利要求1至5中任意一项所述的用于检测次黄嘌呤和黄嘌呤的工作电极的制备方法,其特征在于:
所述具有纳米纤维结构的铜金属有机骨架材料是采用Cu(NO3)2·6H2O与天冬氨酸制备而成。
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