[发明专利]一种脾氨肽的制备方法

说明书

本发明涉及动物脾脏的深加工技术领域，尤其涉及一种脾氨肽的制备方法。该方法采用新鲜牲畜脾脏为主要原料，经过前处理、酶解、固液分离、脱脂纯化、纳滤、浓缩纯化，得到脾氨肽的浓缩液。该浓缩液可经冻干后即得到冻干产品。本发明所提供的制备方法生产周期短、成本低、对环境无污染，而且所得产品安全性高，纯度高、活性高、分子量可控，可广泛应用于食品、特医食品、保健品、药品等领域。

技术领域

本发明涉及动物脾脏的深加工技术领域，尤其涉及一种脾氨肽的制备方法。

背景技术

脾脏是机体最大的免疫器官，占全身淋巴组织总量的25％，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，是机体细胞免疫和体液免疫的中心。脾脏有滤血的功能，其边缘区和脾索是滤血的主要场所。脾内的大量巨噬细胞可以清除衰老的血细胞(比如红细胞)、抗原和异物。侵入机体血内的抗原可在脾脏内激发免疫反应。此外，脾脏还能够储藏血液，如，马的脾脏则存储了马体内大约30％的红细胞。胚胎发育早期，脾脏有造血的功能。但出生后脾脏的造血功能基本消失，仅在部分条件刺激下才能够恢复。

以动物脾脏为原料生产的脾氨肽能增加CD3细胞的数量，促进T淋巴细胞活性，从而对T淋巴细胞介导的细胞免疫发挥作用。因此，脾氨肽作为免疫体调节剂，能改善细胞免疫功能低下所引起的损伤机体健康的多种情况，提高机体免疫力。现有的用动物脾脏生产脾氨肽的方法中有蛋白酶酶解、色谱分离提取、透析等，分别存在产品分子量偏大、小分子多肽的提取效率低、使用有机溶剂以及操作时间长等问题。

发明内容

针对现有生产脾氨肽的技术存在的产品分子量偏大、小分子多肽的提取效率低的问题，本发明提供一种脾氨肽的制备方法。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下技术方案：

一种脾氨肽的制备方法，具体包括以下步骤：

步骤a、将新鲜牲畜脾脏处理成碎块，作为原料；

步骤b、依次用脂肪酶、内切蛋白酶、外切蛋白酶对所述原料进行酶解；其中所述脂肪酶为微生物脂肪酶和固定化脂肪酶；

步骤c、固液分离，将所得液体进行脱脂纯化，纳滤，浓缩纯化。

本发明所提供的脾氨肽的制备方法中的酶解先采用脂肪酶和内切蛋白酶共同进行酶解，脂肪酶分解了动物脾脏中的脂肪，让蛋白质成分从脾脏组织里分离出来，再由内切蛋白酶对组织分离出来的蛋白质进行酶解得到脾氨肽，从而提高了从原料中提取肽的提取率，即，从单位重量的脾脏中提取出更多脾氨肽；同时，脂肪酶减少了酶解液中的脂肪成分，使酶解液粘稠度降低，更容易过滤，使更多的脾氨肽进入下一工序，有利于提高脾氨肽的收率，即，终产品中的脾氨肽占脾脏中提取出的脾氨肽的比例；将微生物脂肪酶和固定化脂肪酶结合使用，能够克服微生物脂肪酶单用的不稳定性，使脂肪分解更彻底；蛋白质大分子经内切蛋白酶的酶解后，肽链中的疏水性氨基酸暴露出来，接触味蕾时会产生苦味，外切蛋白酶能够切除酶解后肽键两端的苦味基团，使产品口感更好，充分满足食品和保健品对原料的口感要求；通过纳滤能够分离得到所需分子量的脾氨肽，使产品更适用于药品或保健食品的要求。本方法中的脾脏来源包括猪、牛、羊等，价廉易得，原料丰富。

本发明所提供的脾氨肽制备方法生产周期短、成本低、不需使用有机试剂、对环境无污染，不产生任何有毒有害物质，所得产品安全性高、纯度高、活性高、分子量可控、无异味、无苦味，可广泛应用于食品、保健食品、药品等。

优选地，步骤a中将牲畜脾脏处理成碎块的方法为冷冻后粉碎。冷冻后的脾脏有较高的脆性，易于粉碎。该粉碎方法能够避免脾氨肽因高温而受到破坏，更好地保存脾氨肽活性。