[发明专利]一种刺槐组织培养方法

说明书

本发明公开了一种刺槐组织培养方法，该方法通过对MS基础培养基进行改进，采用GS培养基中的大量元素，同时去除MS的大量元素，改良MS培养基中的无机盐浓度和配比，合并组成基础培养基后，可以有效的提高不定芽诱导率，并且培养出来的组培苗成活率高，栽培后生长旺盛，生长势强。

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，具体涉及一种刺槐组织培养方法。

背景技术

刺槐最适宜山区造林绿化，不仅是矿柱、枕木、车船、农具等重要用材来源，而且是良好的蜜源植物。其耐旱、适应性强、生长快、繁殖易、用途广，是重要的速生用材树种之一，是我国西北、华北等地区优良的保持水土、防风固沙、改良土壤和″四旁″绿化树种。刺槐树对二氧化硫、光化学烟雾等具有一定抗性，并且外形树冠高达、叶色鲜绿素雅而芳香，是园艺中最佳的树种；此外刺槐树的木材坚硬、耐水湿，具有很高的经济价值；并且刺槐耐盐碱，将其作为盐碱地的种植植被，能够使得盐碱地林业生态功能得以提升，并且通过选育耐盐刺槐树种造林，能够有效的改善盐碱地生态功能。因此，刺槐的需求量也越来越高。

由于刺槐组培的研究较少，对其研究还处于初级阶段，因此在组培过程中出现的各种问题需要通过不断摸索才能成功，在试验过程中发明人发现，将常规的MS作为基础培养基，在接种后，不定芽诱导率较低，并且在生根过程中发现虽然生根，但是根系较少，成活率虽然不低，但是移栽后生长不旺盛的现象。

发明内容

针对上述存在的问题，本发明提供一种刺槐组织培养方法，该方法通过对培养基进行改进，提高了不定芽诱导率，培养出来的组培苗成活率高，栽培后生长旺盛，生长势强。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种刺槐组织培养方法，所述方法包括如下步骤：

(1)外植体的选择及消毒处理：以幼嫩的刺槐茎尖为外植体，用自来水冲洗干净后放入75％酒精中30～45s，无菌水冲洗2～3遍后，用0.1％的HgCl₂浸泡灭菌4～6min，再用无菌水冲洗2～3遍备用；

(2)接种培养：将经过步骤(1)消毒处理的外植体接种到接种培养基中，所述接种培养基为GS的大量元素+去除大量元素的MS+2，4-D0.5～1mg/L+6-BA 2.5～5mg/L+GA₃0.025～0.05mg/L+蔗糖3.5％+琼脂0.4％，每瓶只接一段外植体，培养2～3天开始生长，每30天接转一次；

(3)生根培养：将经过继代培养的分化芽转移到生根培养基上诱导生根，25～30天开始生根，当根生长到3em左右出瓶；所述生根培养基为：GS的大量元素+去除大量元素的MS+IAA0.6～0.8mg/l+蔗糖3.0％+活性炭0.1％。

其中，接种培养的条件为：pH值为5.8，培养温度为24～28℃，光照强度1400～2000lx，光照时间为12～14小时/天。

生根培养的培养条件为：pH值为5.8，温度为22～25℃，光照强度2600～28001x，光照时间为12～14小时/天。

进一步地，上述刺槐组织培养方法，还包括组培苗移栽，具体如下：出瓶前练苗一周，先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗1～2d，然后解开封口膜，炼苗4～6d，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，用多菌灵或百菌清1000倍液清洗并浸泡幼苗根部，然后移栽到经消毒的基质中，温度控制在24-26℃，湿度控制在70％左右，14d以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下，炼苗移栽期间要遮光，使光照强度为自然光的40～60％。

优选地，所述栽培基质为泥炭土和珍珠岩混合基质，两者以3∶1的体积比混合。

本发明方法具有如下优点：