[发明专利]液态25-羟基维生素D校准品稀释液

说明书

本发明公开了一种液态25‑羟基维生素D校准品稀释液包含以下组分：缓冲液、蛋白质类稳定剂、防腐剂、环戊烷多氢菲类稳定剂。本发明的主要创新之处在于：a)首次将7‑脱氢胆固醇应用于25‑羟基维生素D校准品稀释液，用于提升25‑羟基维生素D在液态有氧条件下的稳定性；b)校准品稀释液中的所有组分均是最优配方，给25‑羟基维生素D校准品的稳定性提供了有力保障，在2‑8℃条件下可稳定保存12个月；c)将液态25‑羟基维生素D校准品用于血清样品中25羟基维生素D的检测，检测时无需进行校准品复溶，且多次定标的校准曲线可重复性优于冻干校准品的校准曲线。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术，尤其是涉及一种稳定的液态25-羟基维生素D校准品稀释液。

背景技术

维生素D是一种类固醇激素，有两个主要类型：维生素D2（麦角钙化醇）和维生素D3（胆钙化甾醇），它们的结构很相似，只是侧链有差别。人体内的维生素D主要来源于皮肤中的7-脱氢胆固醇经紫外线照射转变成维生素D3，此外还包括从鱼、肉等食物中摄取的维生素D3和膳食补充剂中的维生素D2。无论哪种形式的维生素D，在血液中均与结合蛋白结合后运输至肝脏，在肝脏中被转换成为25-羟基维生素D，而后在肾脏中被转化为1,25-双羟基维生素D，这是维生素D发挥作用的生物活性成分。但循环中的1,25-双羟基维生素D含量极少，半衰期仅有4h，而循环中的25-羟基维生素D含量是1,25-双羟基维生素D的1000倍，是维生素D在循环中的主要存在形式，半衰期3周，能够反映人体维生素D的真实水平，是反映个体维生素D状态的最佳指标。

维生素D及其代谢产物不溶于水，易溶于乙醇，且化学性质不稳定，容易在光照和湿热条件下发生分解。目前，国外体外诊断试剂生产企业研发的25-羟基维生素D校准品均为冻干品。冻干校准品存在以下缺点：生产工艺复杂，增加企业生产成本；使用前需要复溶，给操作带来不便；复溶过程中操作者操作误差可能对准确度带来影响，导致检测结果出现偏差；复溶后校准品不易保存。

发明内容

本发明的目的在于提供一种液态25-羟基维生素D校准品稀释液，该校准品稀释液配方可用于配制稳定的液态25-羟基维生素D校准品，并用于检测人血清中25羟基维生素D含量。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的液态25-羟基维生素D校准品稀释液包含以下组分：缓冲液、蛋白质类稳定剂、防腐剂、环戊烷多氢菲类稳定剂。

所述环戊烷多氢菲类稳定剂为7-脱氢胆固醇、胆固醇、胆汁酸、麦角固醇、β-谷固醇中的一种或任意两种以上混合物，其浓度为0.01-100mmol/L。

所述环戊烷多氢菲类稳定剂优选采用7-脱氢胆固醇。

所述缓冲液为Tris缓冲液、PBS缓冲液、MES缓冲液、HEPES缓冲液、Taps缓冲液、Mops缓冲液中的一种或任意两种以上混合液，缓冲液浓度为20-200mmol/L。

所述防腐剂为Proclin 300、MIT、Bro、IPBC、NaN3中的一种或任意两种以上混合物，其浓度为0.1%-0.5% w/v。

实际配制时，其配方为：PBS缓冲液20-500mmol/L，人血清白蛋白1%-10% w/v，Proclin 300 0.1%-0.5% w/v，7-脱氢胆固醇0.01-100mmol/L。

四组分优选配方为：PBS缓冲液100mmol/L，人血清白蛋白3% w/v，Proclin 3000.2% w/v，7-脱氢胆固醇2.0mmol/L。

本发明提供了一种易于生产、便于操作并且可以使液态校准品稳定保存的校准品稀释液配方。使用该稀释液配方制备的校准品，在生产时无需进行冻干工序，缩短了生产周期，降低了生产成本；用户在使用时可直接将校准品加入仪器，无需经过复溶环节，避免了复溶时带来的准确度偏差；使用后的校准品仍可以稳定保存。