[发明专利]白芷药材的UPLC特征图谱构建方法和检测方法有效
| 申请号: | 201811572560.9 | 申请日: | 2018-12-21 |
| 公开(公告)号: | CN109406681B | 公开(公告)日: | 2021-11-16 |
| 发明(设计)人: | 黎晓丽;陈菊英;雷桥仕;索彩仙;梁慧;马瑞瑞;吴文平;杨晓东;陈向东 | 申请(专利权)人: | 广东一方制药有限公司 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/36 |
| 代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 向薇 |
| 地址: | 528251 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 白芷 药材 uplc 特征 图谱 构建 方法 检测 | ||
1.一种白芷药材的UPLC特征图谱构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
参照物溶液的制备:称定欧前胡素对照品,加溶剂溶解,即得参照物溶液;
供试品溶液的制备:称定白芷药材,加入提取溶剂进行超声或回流提取,滤过,取续滤液,即得所述供试品溶液;所述提取溶剂为甲醇、体积浓度为45-55%的甲醇水溶液、乙醇或体积浓度为45-55%的乙醇水溶液;
特征图谱的建立:分别吸取所述参照物溶液和供试品溶液,注入超高效液相色谱仪,测定,即得所述特征图谱;所述特征图谱中包括水合氧化前胡素、白当归素、8-甲氧基补骨脂素、佛手苷内酯、白当归脑、氧化前胡素、欧前胡素、珊瑚菜素、异欧前胡素特征峰;
其中所述超高效液相色谱采用的洗脱条件为:以乙腈为流动相A,以体积浓度为0.05-0.15%的乙酸水溶液为流动相B;采用梯度洗脱;
所述梯度洗脱的方法为:
0-5.5min,流动相A的体积百分数由15%上升至28%,流动相B的体积百分数由85%降低至72%;
5.5-7min,流动相A的体积百分数由28%上升至40%,流动相B的体积百分数由72%降低至60%;
7-9.5min,保持流动相A的体积百分数为40%,流动相B的体积百分数为60%;
9.5-15.5min,流动相A的体积百分数由40%上升至65%,流动相B的体积百分数由60%降低至35%;
15.5-15.51min,流动相A的体积百分数由65%降低至15%,流动相B的体积百分数由35%上升至85%;
15.51-18min,保持流动相A的体积百分数为15%,流动相B的体积百分数为85%。
2.根据权利要求1所述的白芷药材的UPLC特征图谱构建方法,其特征在于,所述提取溶剂为体积浓度为45-55%的乙醇水溶液。
3.根据权利要求1所述的白芷药材的UPLC特征图谱构建方法,其特征在于,所述提取溶剂为体积浓度为45-55%的乙醇水溶液,用量为每0.5g白芷药材加入10-50mL;提取时间为20-40min。
4.根据权利要求1-3任一项所述的白芷药材的UPLC特征图谱构建方法,其特征在于,所述超高效液相色谱的条件为:色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;所述流动相的流速为0.25-0.4mL/min;柱温为30-40℃;检测波长为300nm或254nm。
5.根据权利要求1-3任一项所述的白芷药材的UPLC特征图谱构建方法,其特征在于,所述特征图谱包括16个特征峰,以峰13欧前胡素的色谱峰为参照峰S峰,各特征峰的相对保留时间应在规定值的±10%之内,所述规定值为:峰1:0.19、峰2:0.26、峰3:0.35、峰4:0.43、峰5:0.49、峰6:0.51、峰7:0.58、峰8:0.61、峰9:0.67、峰10:0.71、峰11:0.79、峰12:0.81、峰13:1、峰14:1.05、峰15:1.11、峰16:1.12。
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