[发明专利]一种电化学免疫传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种电化学免疫传感器在制备前列腺特异抗原检测试剂盒中的应用，其特征在于，所述电化学免疫传感器包括工作电极，所述工作电极包括铂电极表面包覆有氧化石墨烯/聚离子液体复合材料层的修饰电极，以及与待分析目标物特异性结合的抗体1和抗体2，所述抗体1为鼠抗PSA单克隆抗体，固定于氧化石墨烯/聚离子液体复合材料层，所述抗体2为鼠抗前列腺特异性抗原单抗，标记有二茂铁甲酸；

所述工作电极的制备方法包括以下步骤：

(1)制备修饰电极：铂电极先经抛光处理至氧化还原峰电势分离度为64mV，将氧化石墨烯和带烯键的离子液体以质量比为1:2在引发剂存在下进行自由基聚合反应制得氧化石墨烯/聚离子液体复合材料，所述带烯键的离子液体为氯化-1-烯丙基-3-甲基咪唑，再与壳聚糖醋酸溶液混合制得氧化石墨烯/聚离子液体溶液，涂于抛光后的铂电极上，干燥，制得修饰电极；

(2)固定抗体1：将步骤(1)制得的修饰电极活化后，将抗体1滴加于活化后的电极表面，静置使抗体1固定在氧化石墨烯/聚离子液体复合材料层；所述活化为将浓度为10mM的EDC-NHS滴加在步骤(1)制得的修饰电极表面，室温下活化30～50min；

(3)待分析目标物结合：将步骤(2)制得的固定有抗体1的电极经BSA封闭后，滴加待分析目标物进行孵育；

(4)结合抗体2：在步骤(3)制得的结合待分析目标物的电极上滴加标记有二茂铁甲酸的抗体2，静置孵育，制得所述的工作电极。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述引发剂为偶氮二异丁腈，自由基聚合反应的条件为在惰性气体保护下，70-80℃反应14-15h。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗体2的制备方法为抗待分析目标物的单克隆抗体、EDC-NHS、PBS缓冲液和二茂铁甲酸经超声混合制得，其中抗待分析目标物的单克隆抗体与二茂铁甲酸的质量比为1：10～100。