[发明专利]一种用HPLC分离测定依帕列净原料药有关物质的方法

说明书

本发明提供了一种用HPLC分离测定依帕列净原料药有关物质的方法，包括如下步骤：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以水为流动相A、乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.8～1.2ml/min，柱温为25～40℃，采用紫外检测器对依帕列净原料药的有关物质进行检测，所述紫外检测器的检测波长为205～230nm。本发明所述的用HPLC分离测定依帕列净原料药有关物质的方法，通过综合考虑分析柱、流动相、梯度洗脱程序以及流速、柱温对分离检测的综合影响，从而有效的控制原料药的质量，并且该检测方法灵敏度高、专属性强、精密度高、准确性强、快速简便、操作方便，适用于分离测定依帕列净原料药的有关物质。

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域，具体涉及一种用HPLC分离测定依帕列净原料药有关物质的方法。

背景技术

依帕列净(Empagliflozin，商品名Jardiance)，由勃林格殷格翰与礼来公司联合开发的一种新型的抗糖尿病药物，于2014年08月01日经美国食品药品监督管理局(FDA)批准上市，用于改善2型糖尿病成人患者的血糖控制。依帕列净是一种新的钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂药物，通过抑制肾脏对葡萄糖的重吸收，增加葡萄糖排泄，进而降低糖尿病患者已升高的血糖水平。分子式为C₂₃H₂₇ClO₇，分子量为450.91，结构式如下式(1)：

依帕列净在制备过程中，因起始原料、合成工艺、降解等多种因素产生多个杂质，其中以杂质A、杂质B、杂质C、杂质D和杂质E在合成工艺中较易产生，作为有关物质项目中主要考察杂质，其限度要求均为不得过0.10wt％。

依帕列净杂质A为合成工艺起始原料，分子式：C₁₇H₁₆BrClO₂，分子量：367.66，化学结构式如下式(2)：

依帕列净杂质B为中间体Ⅳ，分子式：C₃₁H₃₅ClO₁₁，分子量：619.06，化学结构式如下式(3)：

依帕列净杂质C为中间体Ⅱ，分子式：C₂₄H₂₉ClO₈，分子量：480.93，化学结构式如下式(4)：

依帕列净杂质D为中间体-II合成中，碳负离子不同位置进攻葡萄糖酸内酯上的羰基，形成不同手性中间体，最终生成依帕列净相应的异构体杂质，分子式：C₂₃H₂₇ClO₇，分子量：450.91，化学结构式如下式(5)：

依帕列净杂质E为合成依帕列净中糖的片断可能开环形成杂质，分子式：C₂₃H₂₉ClO₈，分子量：468.9，化学结构式如下式(6)：

为了控制依帕列净原料药的质量，需要对主要成分和杂质进行控制，在现有的技术中，没有适合于快速、简便、精确分析检测依帕列净原料药有关物质的分析方法。因此，对于依帕列净原料药有关物质的测定方法存在进一步的改进和优化需求。

发明内容

为了克服现有技术存在的上述技术问题，本发明人在进行了大量的深入研究之后，从而提供了一种用HPLC分离测定依帕列净原料药有关物质的方法，具有快速简便、灵敏度高、准确可靠的优点。

本发明采用的技术方案是：