[发明专利]一种从多穗石柯中提取分离根皮苷的方法

说明书

本发明公开了一种从多穗柯中提取分离根皮苷的方法，其包括以下步骤：第一步：清洗、烘干、粉粹，得到多穗柯粉体；第二步：提取多穗柯黄酮类，得到多穗柯黄酮粗提物；第三步：对第二步中的沉淀物进行二次分离提取，得到多穗柯黄酮粗提物；第四步：分离纯化多穗柯黄酮粗提物，得到分离产物；第五步：对大孔吸附树脂分离产物进行分离纯化，最终得到根皮苷结晶状速溶粉体。本发明的从多穗柯中提取分离根皮苷的方法能够提取高纯度多穗柯根皮苷且在提取分离过程中仅使用水和乙醇作为溶剂，对环境污染少。

技术领域

本发明属于多穗柯提纯技术领域，具体地涉及一种从多穗柯中提取分离根皮苷的方法。

背景技术

根皮苷是根皮素的葡萄糖苷，属于黄酮类中的二氢查尔酮类物质。二氢查尔酮在自然界中分布很少，被称为“少数黄酮类”。根皮苷可竞争性的抑制葡萄糖转运载体对葡萄糖分子的运输，减少胰岛素抵抗，提高高密度脂蛋白含量，降低低密度脂蛋白含量，因此具有显著降低空腹血糖、改善脂代谢状况的作用。另外，根皮苷具有非常高的甜度，为蔗糖的300倍，而热量仅为蔗糖的1/300，可以直接添加到食品中，因此在新型药物和天然保健食品开发中具有广泛的应用前景。根皮苷最初由蔷薇科苹果属植物中被发现，随后菊科、杜鹃花科、豆科、壳斗科、百合科等植物中也报道有根皮苷的存在，但含量均较少。近年来在壳斗科石柯属植物—多穗石柯Lithocarpus polystachyus (Wall.) Rehd.）中发现了含量高达6%的根皮苷，因此受到广泛关注。多穗石柯（多穗柯）别名“甜茶”，以野生形式零星分布于我国长江以南各省区的低山密林中。多穗柯属药食同源植物，兼具茶、糖、药三种功能。多穗柯内具有丰富的黄酮类及其根皮苷资源，如何能够高纯度地提取多穗柯中的根皮苷是目前需要积极研究的问题。现有技术中虽然公开了多种从多穗柯中提取根皮苷的方法，然而该方法通常效率低、且工艺复杂、成本高，由于在提取根皮苷过程中使用到有机溶液等溶液，对溶液排放时对环境亦会产生一定的影响。

发明内容

有鉴于此，为了克服现有技术的上述缺陷，本发明的目的在于提供一种从多穗柯中提取分离根皮苷的方法，其能够提取高纯度多穗柯根皮苷且在提取分离过程中仅使用水和乙醇作为溶剂，对环境污染少。

为了达到上述目的，本发明提供一种从多穗柯中提取分离根皮苷的方法，其包括以下步骤：

第一步：对多穗柯新鲜叶片经清洗、烘干和粉碎操作，并过30目筛，得到多穗柯粉体；

第二步：提取多穗柯黄酮类；使用乙醇水溶液为提取液，多穗柯粉与提取液的比例为1：10-12，预煮5-6分钟，在功率为250-300W的超声下处理20-25min，将超声提取到的液体置于离心机中得到上清液和沉淀物，上清液作为多穗柯黄酮粗提物；

第三步：将沉淀物与乙醇水溶液1：5-4的比例混合，将混合液置于800W的微波下处理20-25min，将微波提取到的液体至于离心机中得到上清液和沉淀物，上清液作为多穗柯黄酮粗提物；

第四步：分离纯化多穗柯黄酮粗提物；采用大孔吸附树脂ADS-7对多穗柯黄酮粗提取进行分离纯化，工艺条件为：黄酮粗提物溶液体积与ADS-7树脂质量之比为5-4:1、在PH为中性的条件下静态吸附2.0-3.0h，然后使用乙醇水溶液作为洗脱剂，以1-2 BV/h的流速进行动态洗脱2.0-3.0h，得到分离产物；

第五步：对ADS-7分离产物进行分离纯化；上样量为20 mg/g，使用乙醇水溶液以流速1.5BV/h洗脱4 h，收集洗脱液并进行浓缩、挥干后得倒固体样品，将固体样品溶解于PH为5的70%食用乙醇水溶液中形成80mg/ml溶液，放置于冰箱中结晶，最后得到高纯度的根皮苷结晶状速溶粉。

进一步地，所述第二步中使用的乙醇水溶液中乙醇的体积分数为90%。

进一步地，所述第三步中使用的乙醇水溶液中乙醇的体积分数为85%。

进一步地，所述第四步中使用的乙醇水溶液中乙醇的体积分数为65%。