[发明专利]新型多价免疫球蛋白

说明书

本发明提供与一个细胞的至少2个细胞表面分子特异性结合的多价免疫球蛋白或其部分、它们的用途和制备它们的方法，在所述免疫球蛋白的至少一个结构环区中至少一个修饰决定其与所述细胞表面分子的表位结合，其中未经修饰的免疫球蛋白不显著结合所述表位。

本申请是分案申请，其母案的中国申请号是200780032991.X，国际申请号是PCT/AT2007/000313，申请日是2007年6月26日。

技术领域

本发明提供与一个细胞的至少2个细胞表面分子特异性结合的多价免疫球蛋白或其部分、它们的用途和制备它们的方法，在所述免疫球蛋白的至少一个结构环区中至少一个修饰决定其与所述细胞表面分子的表位结合，其中未经修饰的免疫球蛋白不显著结合所述表位。

背景技术

在很多治疗性、诊断性和分析应用中业已发现单克隆抗体的用途。

基本的抗体结构在本文用完整的IgG1免疫球蛋白作为例子予以阐明。两条同样的重链(H)和两条同样的轻链(L)结合形成Y形抗体分子。每一条重链都有四个结构域。氨基端可变区(VH)位于Y的顶部。跟随着的是三个恒定区：CH1、CH2和羧基端CH3，CH3位于Y主干的底部。一段短的区段，即转换区，将重链的可变区和恒定区连接起来。铰链将CH2和CH3 (Fc片段)与抗体其余部分(Fab片段)连接起来。完整的抗体分子通过蛋白酶在铰链处切割可产生一个Fc片段和两个同样的Fab片段。轻链由可变区(VL)和恒定区(CL)这两个结构域构成，VL和CL通过转换区分隔开。

铰链区内的二硫键连接着两条重链。轻链通过另外的二硫键与重链偶联。Asn-连接的碳水化合物部分视免疫球蛋白类别连接在恒定区的不同位置。对于IgG1，在Cys235和Cys238对之间的铰链区内的两个二硫键连接两条重链。轻链由位于CH1结构域的Cys229s和CL结构域的Cys214s之间的另外的两个二硫键与重链偶联。碳水化合物部分连接到每个CH2的Asn306，在Y主干形成明显的突出部分。

这些特征具有意义深远的功能结果。重链和轻链两个的可变区(VH)和(VL)都位于Y的“顶部”，它们在那儿与抗原反应。分子的这一顶部是氨基酸序列N端所位于的一侧。Y主干以有效介导效应子功能的方式突出，例如补体活化和与Fc受体相互作用、或ADCC和ADCP。其CH2和CH3结构域突出以促进与效应蛋白的相互作用。氨基酸序列的C端位于顶部的相反一侧，可将其称为Y的“底部”。

在抗体中发现命名为λ (lambda)和κ (kappa)的两种类型的轻链。特定免疫球蛋白具有κ链或λ链，从来不会一样一条。在具有λ或κ轻链的抗体之间还没有发现功能上的差别。

抗体分子中的每个结构域都有一个相似的结构：两个β片层在挤压式反向平行β桶中彼此紧密堆叠在一起。这种保守结构称为免疫球蛋白折叠。免疫球蛋白恒定区折叠含有4股片层和3股片层，其中4股片层针对3股片层堆叠在一起。通过在各个片层β链之间的氢键结合、通过内部相对片层残基之间的疏水键结合和通过各片层之间的二硫键来稳定所述折叠。3股片层包含C、F和G链，4股片层有A、B、E和D链。字母A到G表示沿着免疫球蛋白折叠的氨基酸序列的β链的次序位置。

可变区折叠具有9个β链(beta strand)，排列在4股和5股的两个片层内。5股片层在结构上与恒定区的3股片层同源，但含有额外的C'和C''链。其余的链(A、B、C、D、E、F、G)在恒定区免疫球蛋白折叠中，与其配对物在拓扑学上相同，在结构上相似。二硫键将在相对片层中的B链和F链连接起来，如同在恒定区一样。

免疫球蛋白轻链和重链可变区都含有三个高变环，即互补决定区(CDR)。V区的三个CDR (CDR1、CDR2、CDR3)在β桶的一端串在一起。CDR为连接免疫球蛋白折叠的β链B-C、C'-C''和F-G的环。不同免疫球蛋白分子的CDR中的残基有变化，使得每种抗体对抗原具有特异性。