[发明专利]一种磁性微球吸附剂的制备方法及分离脂肪氧合酶的方法

权利要求书

1.一种分离脂肪氧合酶的方法，用于分离糙米米粉中的脂肪氧合酶，其特征在于，包括以下步骤：

向湿法制粉得到的糙米米浆中加入甲壳素基磁性微球吸附剂，在20～30℃、100～200rpm下搅拌2～6h，然后回收所述甲壳素基磁性微球吸附剂，得到脱除脂肪氧合酶后的糙米米粉，其中，所述甲壳素基磁性微球吸附剂通过以下步骤制得：

步骤S10、将纯化后的甲壳素粉末分散于氢氧化钠、尿素和水的混合液中，经过冷冻后再解冻，得到透明的甲壳素溶液；

步骤S20、向所述甲壳素溶液中加入异辛烷与司班85的混合物，搅拌后再加入吐温85继续搅拌，至得到形成有固体微球的混合溶液；

步骤S30、将所述混合溶液加热至使其中的固体微球凝固后，调节所述混合溶液的pH值至呈中性，然后从所述混合液中分离出所述固体微球并进行清洗，得到甲壳素微球；

步骤S40、向氯化亚铁的水溶液中加入所述甲壳素微球后，再加入双氧水溶液，在隔绝氧气环境下搅拌制得甲壳素基磁性微球吸附剂。

2.如权利要求1所述的分离脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步骤S10中：所述混合液中的所述甲壳素、所述氢氧化钠、尿素和水的质量分数对应为4～8％、8～14％、2～6％和72～86％。

3.如权利要求1或2所述的分离脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步骤S10具体包括：

将纯化后的甲壳素粉末分散于氢氧化钠、尿素和水的混合液中，于-60～-30℃温度下冷冻4～8h，然后在20～25℃温度下搅拌解冻后，重复冷冻-解冻循环一次，形成溶解液，再将所述溶解液于-2～0℃、6000～9600rpm条件下离心15～90min，得到透明的甲壳素溶液。

4.如权利要求1所述的分离脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步骤S20中：每100g所述甲壳素溶液中对应加入所述异辛烷、所述司班85和所述吐温85的质量依次为200～500g、0.5～2.5g和4～6g。

5.如权利要求1或4所述的分离脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步骤S20具体包括：

将异辛烷和司班85加入容器中进行第一次搅拌；待所述第一次搅拌完成后，将所述甲壳素溶液滴加入所述容器中，再进行第二次搅拌；待所述第二次搅拌完成后，再向所述容器中加入吐温85，进行第三次搅拌至得到形成有固体微球的混合溶液。

6.如权利要求5所述的分离脂肪氧合酶的方法，其特征在于，

所述第一次搅拌、第二次搅拌和第三次搅拌的搅拌转速相同，且搅拌转速为400～1300rpm，所述第一次搅拌的搅拌时间为30～90min，所述第二次搅拌和所述第三次搅拌的搅拌时间为1～4h；

所述第一次搅拌、第二次搅拌和第三次搅拌均在冰水浴中进行。

7.如权利要求1所述的分离脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步骤S30具体包括：

步骤S31、将所述混合溶液在60～100℃下加热5～10min，以使所述混合溶液中的固体微球凝固，然后使用稀盐酸调节所述混合溶液的pH值至呈中性后，再从所述混合溶液中分离出得到固体微球；

步骤S32、将所述固体微球使用水和乙醇清洗后进行干燥处理，得甲壳素微球。

8.如权利要求1所述的分离脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步骤S40具体包括：

向氯化亚铁的水溶液中加入所述甲壳素微球，形成悬浊液，然后将所述悬浊液在20～25℃、N₂保护下搅拌0.5～2h后，再加入双氧水溶液继续搅拌3～15min，得甲壳素基磁性微球吸附剂。

9.如权利要求8所述的分离脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步骤S40中：

所述氯化亚铁水溶液中氯化亚铁的摩尔浓度为100～300mmol/L；

所述悬浊液中甲壳素微球的质量分数为0.1～0.5％；

所述双氧水溶液的质量浓度为3～30％。