[发明专利]一类532nm激发的罗丹明类荧光染料及其制备方法

权利要求书

1.一类532 nm激发的罗丹明类荧光染料，其特征在于该荧光染料通过六元环的位置改变，使其分子构象改变，实现更高的荧光量子产率，在乙醇中达到0.85以上，该荧光染料具有如下结构：

，

其中：R₁为5-位并六元环或者7-位并六元环；

R为H、，m=0，1，2或3；

所述532 nm激发的罗丹明类荧光染料的制备方法按如下步骤进行：

（1）中间体1的合成

将5-羟基喹啉溶于四氢呋喃，加入六水合高氯酸镍，不断缓慢加入还原试剂，加完后室温搅拌过夜停止反应，加水淬灭，二氯甲烷萃取，收集有机相，洗涤干燥后除去有机溶剂后得粗产品中间体1；

其中，5-羟基喹啉与六水合高氯酸镍、还原试剂的质量比为1:1-3:0.5-2，

5-羟基喹啉的质量与四氢呋喃的体积比为1:20-40 g/mL；

（2）中间体2的合成

将中间体1和邻苯二甲酸酐溶于甲苯中，加热回流4 - 8 h后停止反应，冷却至室温后，再用冰水浴静置30 min – 60 min后，过滤，滤饼用少量石油醚洗涤，滤饼干燥得中间体2粗产品；

其中，中间体1和邻苯二甲酸酐的质量比为1:1-2，

中间体1的质量与甲苯的体积比为1:40-80 g/mL；

（3）目标染料的合成

中间体1与中间体2溶于甲磺酸和三氟乙酸的混合酸性溶剂中，氮气保护下，加热到140℃，反应两天后，减压除去大部分溶剂后用弱碱性水溶液调节pH值到9-10，二氯甲烷萃取，收集有机相后干燥，除去有机溶剂后，硅胶柱分离，洗脱剂为体积比20-5:1的二氯甲烷和甲醇，减压除去溶剂后得最终产品；

其中，中间体1与中间体2的质量比为1:2-4，

三氟乙酸和甲磺酸的体积比为1:1-5，

中间体1的质量与三氟乙酸的体积比为1:30-80 g/mL。

2.一类如权利要求1所述的532 nm激发的罗丹明类荧光染料的制备方法，其特征在于该方法按如下步骤进行：

（1）中间体1的合成

将5-羟基喹啉溶于四氢呋喃，加入六水合高氯酸镍，不断缓慢加入还原试剂，加完后室温搅拌过夜停止反应，加水淬灭，二氯甲烷萃取，收集有机相，洗涤干燥后除去有机溶剂后得粗产品中间体1；

其中，5-羟基喹啉与六水合高氯酸镍、还原试剂的质量比为1:1-3:0.5-2，

5-羟基喹啉的质量与四氢呋喃的体积比为1:20-40 g/mL；

（2）中间体2的合成

将中间体1和邻苯二甲酸酐溶于甲苯中，加热回流4 - 8 h后停止反应，冷却至室温后，再用冰水浴静置30 min – 60 min后，过滤，滤饼用少量石油醚洗涤，滤饼干燥得中间体2粗产品；

其中，中间体1和邻苯二甲酸酐的质量比为1:1-2，

中间体1的质量与甲苯的体积比为1:40-80 g/mL；

（3）目标染料的合成

中间体1与中间体2溶于甲磺酸和三氟乙酸的混合酸性溶剂中，氮气保护下，加热到140℃，反应两天后，减压除去大部分溶剂后用弱碱性水溶液调节pH值到9-10，二氯甲烷萃取，收集有机相后干燥，除去有机溶剂后，硅胶柱分离，洗脱剂为体积比20-5:1的二氯甲烷和甲醇，减压除去溶剂后得最终产品；

其中，中间体1与中间体2的质量比为1:2-4，

三氟乙酸和甲磺酸的体积比为1:1-5，

中间体1的质量与三氟乙酸的体积比为1:30-80 g/mL。

3.按照权利要求2所述的一类532 nm激发的罗丹明类荧光染料的制备方法，其特征在于：步骤（1）中使用的还原试剂为氰基硼氢化钠、硼氢化钠的一种。

4.一种如权利要求1所述的532 nm激发的罗丹明类荧光染料的应用，其特征在于：该荧光染料光稳定性更高、量子产率更高，应用于生物荧光成像领域。