[发明专利]一种脱细胞血管基质及其制备方法

说明书

本发明涉及组织工程材料技术领域，具体涉及一种脱细胞血管基质及其制备方法，具体方法为：将血管组织依次通过低渗处理、胰蛋白酶处理、去污剂处理和核酸酶处理，制得血管基质，本发明制备的脱细胞血管基质能够最大限度地保留血管细胞基质本身的三维结构，具有良好的机械性能，而且免疫原性低、毒性低，批次间差异性小，而且制备方法简单，成本较低，适宜产业化生产。

技术领域

本发明涉及组织工程材料技术领域，具体涉及一种脱细胞血管基质及其制备方法。

背景技术

随着人民生活水平的提高，饮食习惯的改变以及人口老龄化，心血管疾病的发病率呈逐年上升趋势。心血管疾病是引起人类死亡率和致残率最高的疾病之一。推算心血管病现患人数2.9亿，其中脑卒中1300万，冠心病1100万，肺原性心脏病500万，心力衰竭450万，风湿性心脏病250万，先天性心脏病200万，高血压2.7亿。心血管病死亡占居民疾病死亡构成40％以上，居首位，高于肿瘤及其他疾病。

血管重建是治疗急性心血管疾病的有效手段，近20年来，血管移植在治疗血管源性疾病及器官移植的循环重建中发挥着重要作用。寻找合适的血管移植物是临床工作者迫切需要解决的问题。目前临床工作中所用的血管移植物主要有以下几种：自体血管、同种异体血管，人工血管(包括天然材料和合成型材料)等。自体血管移植是血管重建手术的金标准，常用的自体血管为大隐静脉和内乳动脉。但很多病人因为血管本身存在病变或者曾行剥脱手术而不能获得自体血管，除此之外，获取自体血管的手术增加了病人的创伤，同时也增加了并发症的发生几率。同种异体血管的来源仍有限，且由于异体细胞的残留，长期随访表明此种血管也存在血栓形成、钙化等问题。1954年人工血管的诞生奠定了现代血管外科的基础，但是人工血管由于血管腔面缺乏内皮细胞层，严重影响了其远期通畅率。20世纪80年代后期提出的组织工程学的概念有望解决小口径血管移植物缺乏的难题。血管组织工程研究的基本方法是：将体外培养扩增的，高浓度的血管壁细胞种植于天然或人工合成的细胞外基质(extracellularmatrix，ECM)上，经过一段时间的培养，再将他们移植到体内，取代病损血管组织而发挥正常功能。但是构建组织工程血管的周期较长，大概需要6-8周的时间。而且血管细胞(内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞等)与细胞外基质之间在体内或体外的相互作用尚未研究清楚。近年来脱细胞异种生物型血管是目前研究的热点。因为其来源丰富，价格低廉，但具有较强的免疫原性，直接移植会引发急性免疫排斥反应。大量研究证实，血管内皮细胞是发生免疫排斥反应的核心因素，去除异种血管的内皮细胞可以极大地降低血管移植物的免疫原性。而细胞外基质组分具有物种保守性，几乎不引起免疫排斥反应。

异种脱细胞血管基质是将利用脱细胞技术将组织上的细胞去除而保留其三维结构及细胞外基质组分。脱细胞异种生物血管有利于细胞粘附、增殖及分化，其功能及结构类似于天然血管，具有良好的顺应性，植入体内后通畅率优于合成血管材料。异种脱细胞血管与机体正常的血管结构和功能相似，可以根据环境的变化进行自我的调节和更新，能够自身合成细胞外基质(ECM)，并不断随着环境的变化进行自我重塑；此外这类血管还保存了天然的基底膜和弹力纤维，同时也为血管基质细胞提供了足够的生长空间，易于植入单层内皮细胞(endothelialcells，ECs)及平滑肌细胞(smoothmusclecells，SMC)，并最终形成生理状态的内膜，从而具有很低的血栓发生率；所构建的血管与自体血管有很高的组织相容性，由于其没有合成材料的参与，减少了炎症反应的发生，避免了排斥反应。并且全生物化异种移植血管的柔韧性和顺应性均优于含非生物材料的人工血管，有利于手术操作。