[发明专利]一种萝卜细胞质雄性不育基因分子标记引物及其应用在审
| 申请号： | 201811516672.2 | 申请日： | 2018-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN109338010A | 公开（公告）日： | 2019-02-15 |
| 发明（设计）人： | 汪志伟;郝园园;舒黄英;杨壮;高崇伦;成善汉;朱国鹏 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 赵蕊红 |
| 地址： | 570228 海*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 萝卜细胞质雄性不育 引物 萝卜 分子标记引物 基因分子标记 电泳条带 基因 判定 琼脂糖凝胶电泳检测 细胞质雄性不育基因 辅助选择育种 雄性不育表型 细胞质 基因分型 快速鉴定 扩增片段 特异识别 特异性强 总DNA 准确率 扩增 应用 | ||
1.一种萝卜细胞质雄性不育基因分子标记引物，其特征在于，标记的不育基因为orf138，所述分子标记引物的上游引物具有如SEQ ID NO：1所述的核苷酸序列，为5’-GTATGGGTGGCTAGGTGTCA-3’，下游引物具有如SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列，为5’-TCGGTCCATTTTCCACCTCT-3’。
2.如权利要求1所述的一种萝卜细胞质雄性不育基因分子标记引物，其特征在于，使用所述的分子标记引物对待测萝卜总DNA进行PCR扩增，对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据电泳条带判定待测萝卜是否含有细胞质雄性不育基因orf138，若出现一条212bp的特异片段，则表明待测萝卜中含有orf138基因，若未出现条带则表明不含orf138基因。
3.如权利要求2所述的一种萝卜细胞质雄性不育基因分子标记引物，其特征在于，所述特异片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。
4.如权利要求2或3所述的一种萝卜细胞质雄性不育基因分子标记引物，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系为25μl，具体为DNA模板40ng，2×Taq-mix 12.5μl，上游引物0.2μM，下游引物0.2μM。
5.如权利要求2或3所述的一种萝卜细胞质雄性不育基因分子标记引物，其特征在于，所述PCR扩增的反应程序为：94℃预变性1min，94℃变性20sec，55℃退火30sec，72℃延伸30sec，变性、退火和延伸进行40个循环后72℃延伸5min。
6.如权利要求1或2或3所述的分子标记引物在鉴定萝卜细胞质雄性不育基因orf138中的应用。
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