[发明专利]一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法

权利要求书

1.一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

①、色谱条件设置

①-1、色谱柱：以十八烷基硅氧烷键合硅胶为填充剂；

①-2、柱温：30-38℃；

①-3、流动相：以水为流动相A相，以乙腈为流动相B；

①-4、流动相流速：0.5-1.0ml/min；

①-5、数据处理：外标法峰高定量；

①-6、线性梯度：

0-15min：85％-80％的A相+15％-20％的B相；

16-30min：80％-65％的A相+20％-35％的B相；

31-80min：65％-60％的A相+35％-40％的B相；

81-90min：10％的A相+90％的B相；

且0-30min时的检测波长为252nm，31-90min时的检测波长为231nm；

②、对照品母液的制备

分别精密称取沉香四醇、6-羟基-2-[2-(4′-甲氧基)苯乙基]色酮、6-羟基-2-(2-苯乙基)色酮、6，7-二甲氧基-2-[2-(4′-甲氧基)苯乙基]色酮和6，7-二甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮这五个色酮适量，用提取液溶解并定容，分别取适量混合，经滤膜过滤后得对照品母液；

③、样品分析

③-1、样品前处理：取沉香粉末适量，精密称定，按沉香粉末与提取液的料液重量比为1∶(30-60)加入提取液，超声提取0.8-1.2h，用称重法补偿溶剂损失，抽取溶液适量，经滤膜过滤后得供试品溶液；

③-2、测定：在步骤a的色谱条件下，精密吸取供试品溶液和对照品溶液，依次分别注入高效液相色谱仪中测定，按外标法-直接比较法以二者的峰高比计算沉香中五个色酮的含量；

④、分析结果计算

沉香中五个色酮的含量皆按式(1)计算，

式中：

x-沉香中色酮含量，单位为％；

A₁-供试品溶液测得的峰面积；

A₂-对照品溶液测得的峰面积；

c-对照品溶液浓度，单位为mg/ml；

V-供试品定容体积，单位为mL；

r-色酮对照品的纯度，单位为％；

m-称取供试品的量，单位为mg。

2.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，步骤②和③中的提取液为甲醇。

3.根据权利要求2所述的一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，步骤③中，所述沉香粉末与甲醇的料液重量比为1∶50。

4.根据权利要求2或3所述的一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，步骤③中，所述甲醇的超声提取时间为1.0h。

5.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，步骤③中，所述沉香粉末需过40目的筛网。

6.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，步骤①中，色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μm。

7.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，步骤①中，所述柱温为35℃。

8.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，步骤①中，所述流动相流速为0.8ml/min。

9.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，步骤②中，五个色酮分别经提取液溶解并定容后，密封保存于4℃的冰箱中备用。

10.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定沉香质量的检测方法，其特征在于，步骤②中的甲醇以及步骤③中的提取液在使用前均需经0.22μm的微孔滤膜过滤并脱气处理。