[发明专利]一种金银花中绿原酸和总黄酮的联合提取分离纯化方法

说明书

本发明公开了一种金银花中绿原酸和总黄酮的联合提取分离纯化方法，包括如下步骤：S01，微波辅助浸润：取干燥至恒重的适量金银花药材并放入烧杯中，加入相当于金银花药材80~100倍量的去离子水，室温搅拌浸泡至少1h后，放入微波萃取机中，微波萃取温度为50~60℃，微波萃取功率为400~500W，微波萃取时间为10~30min。本发明的工艺适合金银花中绿原酸和总黄酮的联合提取、分离、纯化，并且绿原酸单体结晶纯度高达75%以上，进一步精制后可达98%以上，整个工艺的操作步骤简单易行，收率高，成本低。

技术领域

本发明涉及一种金银花中绿原酸和总黄酮的联合提取分离纯化方法，属于中药技术领域。

背景技术

金银花因其开花初期为白色，后期又转为黄色，因而得名金银花，其因冬季不落叶又得名“忍冬”。金银花(Lonicera Japonica Thunb)具有悠久的用药历史，是忍冬科忍冬属植物忍冬及同属植物干燥花蕾或初开的花。金银花在全国很多地区种植广泛，其中山东产量最大，河南质量最优，为其道地产地。“金银花”一名始见于李时珍《本草纲目》，它性寒，味甘，入肺、心、胃经，具有清热解毒、抗炎、补虚疗风的功效，主治胀满下疾、温病发热，热毒痈疡，丹毒和肿瘤等症。金银花药用价值和保健用途广泛，社会需求量大。

研究表明金银花中的化学成分主要有：有机酸类、黄酮类、环烯醚萜苷类、三萜皂苷类、挥发油类及其他成分。金银花中的有机酸类成分迄今已分离出40多种，并且以绿原酸类为主。绿原酸是金银花的主要抗菌、抗病毒有效药理成分之一。黄酮类化合物是金银花中的活性化学成分之一，黄酮类化合物中主要包括木犀草苷、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、异鼠李素、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、芹菜素-7-O-L-鼠李糖苷、木犀草素-3'-O-L-鼠李糖苷、芦丁等。

目前金银花的提取方法采用正交法或者响应面法优化后，一般均采用醇提，醇提存在提取剂成本高，提取剂在浓缩过程中回收的溶液的醇浓度发生改变，批量提取时每次均需要调节回收后的醇浓度，操作繁琐，醇用量大，提取成本高。

另外，金银花中绿原酸和黄酮部位的极性相似，用一般的分离纯化手段难以将二者有效分开，发表时间为2018.09.21的论文“金银花中总黄酮和绿原酸加压同步提取的工艺优化”中的提取工艺为“精密称取金银花粉末，置于高温高压反应装置内，按实验条件加压提取；提取液过滤，滤液以6000r/min高速离心分离15min，得上层清液；加入与清液等体积的乙酸乙酯，萃取5次，每次萃取时间为5min，合并萃取液，分别得到含有绿原酸的萃余物和含有总黄酮的萃取物，两者分别通过大孔吸附树脂纯化”，该论文认为，乙酸乙酯可以将绿原酸和总黄酮分离，绿原酸位于水层中，总黄酮位于乙酸乙酯层中，采用乙酸乙酯萃取即可将绿原酸和总黄酮分离，再分别对绿原酸和总黄酮进行过柱纯化即可。上述提取工艺存在以下问题：金银花中的主要黄酮类成分均为黄酮苷，黄酮苷在乙酸乙酯中和绿原酸一样溶解度小，故水层中含有绿原酸和黄酮苷，乙酸乙酯萃取并不能将绿原酸和黄酮苷分离。故论文中得到的黄酮部分得率低，金银花中的大部分黄酮没有被分离纯化得到，造成了资源的极大浪费。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种金银花中绿原酸和总黄酮的联合提取分离纯化方法，该法采用微波法预处理金银花药材后，再采用水热法-酸法提取绿原酸和总黄酮，水热法在高压反应釜体系内部创造一个高温、高压的反应环境，使水处于亚临界状态，从而使水表现出高活性、高穿透性、高传质速率的特点，酸法更能增加金银花中有效成分的溶出效率，使绿原酸和总黄酮提取完全，接着利用萃取除杂后，采用一根优选的强极性大孔吸附树脂柱分离得到绿原酸和总黄酮两个部位，分别经过进一步精制后得到绿原酸单体和总黄酮活性部位，二者提取效率均较高，使金银花药材得到充分的开发利用。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

一种金银花中绿原酸和总黄酮的联合提取分离纯化方法，包括如下步骤：