[发明专利]类风湿因子检测试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种类风湿因子检测试剂盒及其制备方法。该试剂盒包括试剂R1、试剂R2和试剂R3；所述试剂R1中含有包被兔IgG的磁微粒；所述试剂R2中含有抗人IgM/IgG/IgA抗体、抗人IgM抗体、抗人IgG抗体或抗人IgA抗体的标记物；所述试剂R3是由缓冲体系、无机盐、糖类物质、蛋白类物质、着色剂、非离子表面活性剂和防腐剂按一定比例混合组成。本发明的类风湿因子检测试剂盒灵敏度高、线性范围宽、抗干扰能力强，可安全快速的检测类风湿因子。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种类风湿因子检测试剂盒及其检测方法。

背景技术

类风湿因子(rheumatoid factor，RF)是一种抗变性IgG的自身免疫性抗体，可与人及多种动物IgG分子的Fc段结合。RF有IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五种，其中以IgM为主，也可见IgG和IgA，而IgE、IgD少见。类风湿因子与人体内变性IgG形成免疫复合物，激活补体，引起组织损伤。RF可在大多数类风湿关节炎(RA)患者的血清中检测到，是临床上诊断RA的重要依据之一。虽然RF的检测并不能直接得出疾病诊断的结果，必须综合临床症状等多种指标才能得到疾病诊断的结论，但是RF的检测可作为一项重要的参考指标，对于后期RA确诊具有重要意义。

目前，类风湿因子多采用胶乳凝集法和散射比浊法，但是这两种方法不能对RF进行分型检测且灵敏度不高。随着临床上对RF分型检测的认可，国内和国外都已有RF的ELISA产品上市，多采用间接法原理。化学发光平台目前产品较少，但相比操作繁琐的ELISA，化学发光法操作相对简单，且灵敏度高，检测范围宽。所以采用化学发光法进行类风湿因子检测是趋势所在。

化学发光免疫分析是近年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析技术。检测原理是以发光物质作为信号放大系统并借助其发光强度直接测定免疫结合。该方法灵敏度高、检测范围宽，是免疫学检测重要的发展方向。

发明内容

为解决上述现有技术问题，本发明提供一种类风湿因子检测试剂盒及其检测方法。

一种类风湿因子检测试剂盒，该试剂盒包括试剂R1、试剂R2和试剂R3；所述试剂R1中含有包被兔IgG的磁微粒；所述试剂R2中含有抗人IgM抗体、抗人IgG抗体、抗人IgA抗体中一种或多种的标记物；所述试剂R3是由缓冲体系、无机盐、糖类物质、蛋白类物质、着色剂、乙二胺四乙酸二钠、非离子表面活性剂和防腐剂按一定比例混合组成。

在一种优选实施方式中，所述标记物上标记有辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、吖啶酯或吖啶酯衍生物中的一种。

在一种优选实施方式中，所述试剂R3是由以下浓度的组分组成：10～50mM、pH值为6～8的缓冲体系；5～50g/L的无机盐；5～200g/L的糖类物质；5～100g/L的蛋白类物质；0.05～0.5g/L的着色剂；8～50mM的乙二胺四乙酸二钠；0.01～10mL/L的非离子表面活性剂和0.1～10mL/L的防腐剂。

在另一种优选实施方式中，所述试剂R1中的磁微粒为顺磁微粒，该磁微粒选自亲和素磁微粒、甲苯磺酰基磁微粒、羧基磁微粒中的一种；所述试剂R1还包括缓冲体系、无机盐、糖类物质、蛋白类物质、非离子表面活性剂、多元醇和防腐剂；所述R2还包括缓冲体系、无机盐、糖类物质、蛋白类物质、着色剂、非离子表面活性剂、多元醇和防腐剂。

在另一种实施方式中，一种类风湿因子检测试剂盒，该试剂盒是包括试剂R1、试剂R2和试剂R3；

所述试剂R1是由以下浓度的成分组成：

0.2～2mg/mL的包被兔IgG的磁微粒；10～200mM、pH值为6～8.5的缓冲体系；4～50g/L的无机盐；2～300g/L的糖类物质；5～160g/L的蛋白类物质；0.01～10mL/L的非离子表面活性剂；5～50mL/L的多元醇和0.1～10mL/L的防腐剂；

所述试剂R2是由以下浓度的成分组成：