[发明专利]一种利用Y染色体分子标记快速检测普通牛和瘤牛的方法

权利要求书

1.一种利用Y染色体SNP检测父系起源为普通牛或瘤牛的方法，其特征在于：所述Y染色体SNP为公牛Y染色体上USP9Y基因第10940位为C或G的单核苷酸多态性，所述检测方法包括以下步骤：

S1.以包含USP9Y基因的待测公牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增所述待测公牛USP9Y基因；

所述引物对P为：

上游引物：5’- GCGGTTAGTAGAGAGAAAGT -3’；

下游引物：5’- CCAGGTTGAAGTCCACAA -3’；

S2.用限制性内切酶KpnI-HF消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；

S3.根据S2中电泳结果鉴定所述待测公牛USP9Y基因第10940位的基因型及判定所述待测公牛的父系起源：

琼脂糖凝胶电泳结果出现231 bp和158 bp条带，所述待测公牛基因型为GG型，判定其父系起源为瘤牛；琼脂糖凝胶电泳结果出现389 bp条带，所述待测公牛基因型为CC型，判定其父系起源为普通牛。

2.根据权利要求1所述的一种利用Y染色体SNP检测父系起源为普通牛或瘤牛的方法，其特征在于：所述PCR扩增反应程序为：

94℃预变性5 min；94℃变性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，34个循环；72℃延伸10 min。

3.根据权利要求1所述的一种利用Y染色体SNP检测父系起源为普通牛或瘤牛的方法，其特征在于：所述琼脂糖凝胶的质量浓度为1.5%。