[发明专利]一种温育时自封闭反应孔板及其制备方法

说明书

本发明公开了一种温育时自封闭反应孔板，在该反应孔板的反应孔内预包被有石蜡类相变材料；其制备方法为：将市售反应孔板进行改性处理，提高各反应孔内表面的亲水性；选择熔点低于实验温育温度的低熔点石蜡，将石蜡高压灭菌后置于水浴锅中保持液态；根据孔板上各反应孔底面积的大小，用移液枪准确抽取石蜡油垂直加入反应孔中；待石蜡冷却凝固后，将反应孔板用铝箔袋密封，贮存在4~8℃冰箱中。本发明的优点在于制备方法简单，省时、省力，使用效果好。经改性处理的反应孔板大大增加了反应孔的亲水性，减少了疏水性，即减小了低熔点石蜡与反应孔底部的作用力，便于后续实验中低熔点石蜡融化后与孔底分离。

技术领域

本发明涉及体外诊断和科研用反应孔板，尤其是涉及一种温育时自封闭反应孔板，本发明还涉及该反应孔板的制备方法。

背景技术

生物学实验和临床诊断实验，如酶联免疫反应、MTT、微生物微量稀释法药敏实验等，通常采用反应孔板（多孔板）作为实验容器。实验过程中，为了隔绝空气，防止氧化产生假阳性，同时为了避免长时间温育造成反应孔液体中水份挥发贻尽，实验最后往往需要在反应孔中滴加液体石蜡油进行液封，液封后的多孔板再放入温育箱或PCR仪等加热装置进行培养和反应。

液封时，石蜡油一般采用手工滴瓶滴加的方式，对于批量实验来说，滴加石蜡油是一项繁琐和费时的工作，同时因为滴加时间太久，不能及时把孔板放入温育箱中，会对最终结果造成影响；另外，石蜡油使用前需要灭菌处理，灭菌后长期放置容易再次染菌，造成实验污染。有些实验如微量稀释法药敏，需要用酶标仪检测，检测的吸光值（OD值）受液面高度，液体内气泡影响较大，手工滴加石蜡油时，孔与孔间体积的差异会造成液面高度差异，同时将石蜡油直接滴加到水溶性液体中，极易产生气泡，同样对实验结果造成影响。

发明内容

本发明的目的在于针对手工滴加石蜡油进行液封时所存在的上述技术问题，提供一种温育时自封闭反应孔板，本发明还提供该反应孔板的制备方法。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的温育时自封闭反应孔板，包括带有反应孔的孔板，在所述反应孔内预包被有石蜡类相变材料。

所述石蜡类相变材料包括高级烷烃的混合物或纯净物,如正十八烷、二十烷、二十二烷等。

本发明的一种温育时自封闭反应孔板的制备方法包括下述步骤：

第一步，将普通反应孔板进行改性处理，提高各反应孔内表面的亲水性；

第二步，选择熔点低于实验温育温度的低熔点石蜡，将石蜡高压灭菌后置于水浴锅中保持液态；根据孔板上各反应孔底面积的大小，用移液枪准确抽取石蜡油垂直加入反应孔中；

第三步，待石蜡冷却凝固后，将反应孔板用铝箔袋密封，贮存在4~8℃冰箱中。

第一步对反应孔板进行改性处理的方法包括紫外线照射、酸处理、表面生物涂层、高能粒子溅射以及等离子体处理等。

第二步中每个反应孔内滴加石蜡的量为20-1000μl。

本发明的优点在于制备方法简单，省时、省力，使用效果好。经改性处理的反应孔板大大增加了反应孔的亲水性，减少了疏水性，即减小了低熔点石蜡与反应孔底部的作用力，便于后续实验中低熔点石蜡融化后与孔底分离。

使用时，将制备好的封装在铝箔袋内的反应孔板从冰箱取出，恢复室温后，打开袋体，取出反应孔板，按照正常实验流程进行即可；待实验体系添加完成后放入温育箱，随着温度的上升，板孔内的低熔点石蜡融化成液态，上浮到液面顶部，扩散后形成油封层，对反应体系形成保护。实验结束后，从温育箱取出板体，恢复至室温后，低熔点石蜡凝固成透明固体，对观察实验结果无任何影响。