[发明专利]一种硝呋太尔片的需氧菌总数检查法

说明书

本发明属于医药检验技术领域，具体涉及一种硝呋太尔片的需氧菌总数检查法。所述方法包含以下过程：取硝呋太尔片样品，加含缓冲液稀释，摇匀，静置，取上清液，加入氯化铁，并用缓冲液稀释，置于光照强度为15000Lx~20000Lx的环境放置30~40分钟，制得供试液，取供试液注入含100ml缓冲液的微生物限度薄膜过滤器中，摇匀，滤干，取出滤膜，菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基平板上，30～35℃培养3～5天，测定菌落数。本发明采用光照的方法使硝呋太尔灭活，步骤简单，检测结果准确可靠。

技术领域

本发明涉及一种硝呋太尔片的需氧菌总数检查法，属于医药检验技术领域。

背景技术

硝呋太尔具有广谱抗菌活性的呋喃类衍生物，对病原虫、细菌、真菌有强烈的杀灭作用。其可作用于微生物酶系统，抑制乙酰辅酶A，干扰微生物糖类代谢，从而起抑制杀灭作用，正常剂量的硝呋太尔并不影响乳酸菌，能迅速恢复阴道正常的酸性环境。

《中国药典》2015版片剂通则要求片剂需要进行微生物限度检查，其中包含需氧菌总数的检查。硝呋太尔本身对需氧菌的抗菌活性较强，需要适合的方法消除硝呋太尔对细菌影响。 CN108300756 A使用萃取、薄膜过滤的方法消除硝呋太尔的干扰，但萃取存在细菌提取不完全的问题。文献（仝立卿. 硝呋太尔片微生物限度检查方法的探讨[J]. 药学与临床研究, 2008, 16(1):66-68.）使用离心沉淀集菌加培养基稀释的方法消除硝呋太尔的干扰，但操作难度较大，且2015版《中国药典》的微生物限度检查删除了离心沉淀法。

因此，需要一种步骤简单，检测结果准确可靠的硝呋太尔片的需氧菌总数检查法。

发明内容

本发明旨在提供一种步骤简单，检测结果准确可靠的硝呋太尔片的需氧菌总数检查法。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种硝呋太尔片的需氧菌总数检查法，检查步骤包含如下过程：

取硝呋太尔片样品，加含缓冲液稀释，摇匀，静置，取上清液，加入氯化铁，并用缓冲液稀释，置于光照强度为15000Lx~20000Lx的环境放置30~40分钟，制得供试液，取供试液注入含100ml缓冲液的微生物限度薄膜过滤器中，摇匀，滤干，取出滤膜，菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基平板上，30～35℃培养3～5天，测定菌落数。

进一步的，所述的缓冲液为45℃含3%聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。

进一步的，所述的供试液中氯化铁浓度为0.015~0.03g/100ml。

更进一步的，所述的检查步骤包含如下过程：

取硝呋太尔片样品10g，加45℃含3%聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释至100ml，摇匀，静置5分钟，取上清液10ml，加入0.015g~0.03g氯化铁，并用45℃含3%聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释至100ml，置于光照强度为15000Lx~20000Lx的环境放置30~40分钟，制得供试液，取供试液1ml注入含100ml缓冲液的微生物限度薄膜过滤器中，摇匀，滤干，取出滤膜，菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基平板上，30～35℃培养3～5天，测定菌落数。

本发明具有以下优点：

（1）本发明采用光照的方法使硝呋太尔灭活，步骤简单，操作方便，供试液制备不需要复杂的前处理，薄膜过滤时不需要冲洗。

（2）本发明的方法检测准确，稳定可靠。

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。