[发明专利]聚乙二醇修饰的NPFF及其用途

说明书

本发明公开了一种聚乙二醇修饰的NPFF。技术方案是采用聚乙二醇修饰NPFF(NPFF‑PEG)，小鼠足肿炎症模型和LPS刺激生存曲线模型检测NPFF‑PEG的抗炎活性。实验证明，NPFF‑PEG具有良好的抗炎活性。在小鼠足肿炎症模型上，NPFF‑PEG在15mg/kg和30mg/kg分别抑制炎症41.25％和50.74％(12小时)。在LPS刺激生存曲线模型上，NPFF‑PEG 1mg/kg显著延长LPS刺激组(LPS 25mg/kg)的生存时间(14天时，提高75％生存率)。本发明提供一种NPFF‑PEG作为抗炎药物的应用，为治疗相应炎症提供有益帮助，在医药领域有潜在的应用价值。

技术领域

本发明属于医药用途技术领域，具体涉及一种聚乙二醇修饰的NPFF。

背景技术

神经肽FF(Neuropeptide FF,NPFF)是哺乳动物体内的一种内源性神经八肽(FLFQPQRFamide)，其内源性受体NPFFR2(NPFF receptor2，NPFFR2)属于G蛋白偶联受体(GProtein-Coupled Receptor，GPCR)家族。NPFF属于RFamide肽家族(该肽家族的共同特征是其C末段均具有RFamide)。NPFF具有多种生物学功能，包括参与痛觉传导、血压、摄食、内分泌、体温等。由于NPFF广泛分布于体内以及广泛参与体内多种生物学过程，因此，NPFF的研究具有重要意义。

以多肽为代表的蛋白质类药物具有活性强、特异性强等优点，目前应用广泛，但是由于蛋白质类药物参在水溶性、稳定性差，血浆半衰期短等问题，在一定程度上限制了其应用。聚乙二醇(PEG)是指环氧乙烷聚合物，具有较强的氢键键合能力，PEG与药物共价偶联后，可降低免疫原性、提高药物半衰期、提高生物稳定性和体内理化性质(Biomacromolecules.2014；15(5):1543-59)。已有多种PEG修饰的蛋白质药物通过FDA审批，用于临床治疗。PEG修饰是目前多肽药物改进的最有效策略之一。目前，尽管NPFF具有抗炎活性(Peptides.2013；47(1):124-32.)，由于其因为容易降解、半衰期短等问题，限制了其作为药物的开发和应用。目前，尚未见到使用聚乙二醇修饰NPFF的报道。

发明内容

本发明提供一种聚乙二醇修饰的NPFF，采用聚乙二醇修饰NPFF(NPFF-PEG)，小鼠足肿炎症模型和LPS刺激生存曲线模型检测NPFF-PEG的抗炎活性。实验证明，NPFF-PEG具有良好的抗炎活性。在小鼠足肿炎症模型上，NPFF-PEG在15mg/kg和30mg/kg分别抑制炎症41.25％和50.74％(12小时)。在LPS刺激生存曲线模型上，NPFF-PEG 1mg/kg显著延长LPS刺激组(LPS 25mg/kg)的生存时间(14天时，提高75％生存率)。本发明提供一种NPFF-PEG作为抗炎药物的应用，为治疗相应炎症提供有益帮助，在医药领域有潜在的应用价值。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案：一种聚乙二醇修饰的NPFF，采用聚乙二醇修饰NPFF的N端，其分子式是C₆₀H₈₇N₁₅O₁₃，分子量是1226.30，分子结构式是：

一种上述聚乙二醇修饰的NPFF制备方法，其特点是包括以下步骤：

步骤一、在反应容器中，加入N,N-二甲基酰胺，再加入wang树脂，振荡25min；

步骤二、抽滤取出溶剂，加入相当于合成多肽4倍摩尔的Fmoc保护的Phe(Fmoc-L-Phe(4-tBu)-OH)，再加入相当于12倍合成多肽摩尔的二环乙基碳二亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)，再加入DMF溶解，振荡35min，用醋酸酐封闭；

步骤三、抽去DMF，加入体积分数20％的哌啶DMF溶液，抽干10min后，再加入体积分数20％的哌啶DMF溶液，反应20min；