[发明专利]一种根瘤菌YZM0144及其应用

说明书

本发明公开了一种根瘤菌YZM0144及其应用，该菌株系是通过MO花生新品种捕捉自福建省尤溪地区土壤中的根瘤菌,从新鲜根瘤中对根瘤菌进行分离和纯化，并对菌株的16s rDNA部分序列进行测定，通过系统发育分析，确定为慢生根瘤菌属（Bradyrhizobium）的新菌株系，并命名为福农4号。本发明的根瘤菌YZM0144通过实验室水培回接试验以及大田回接实验证明其具有高效结瘤、固氮能力强的特性，接种该根瘤菌能够提高花生生物量以及产量，可适用于华南酸性土壤，作为花生常规栽培的措施之一。

技术领域

本发明属于微生物领域，具体涉及一种根瘤菌YZM0144及其应用。

背景技术

根瘤菌（rhizobium)是一类广泛分布于土壤中的革兰氏阴性细菌，能侵染豆科植物根部或茎部后形成根瘤（root nodule）或茎瘤（stem nodule），以共生体形式固定空气中的 N ₂ 成为植物可吸收利用的NH₄⁺。豆科植物与根瘤菌之间的共生体系在整个生物固氮中占有极其重要的地位。据估计，地球表面每年从空气中固定的氮素约有1亿吨，通过豆科植物和根瘤菌所固定的氮素约有5500万吨。根瘤菌与豆科植物形成共生固氮体系，除了满足植物自身的氮素需要外，还可以将多余的氮提供给与之混种或间种的非豆科植物，如与禾本科植物混播的非豆科植物可以少施氮肥；利用 ¹⁵N 示踪技术，研究发现，与豆科植物混播的禾本科植物 30% 的氮来源于豆科植物所固定的氮。根瘤菌与豆科植物的共生固氮体系具有固氮能力强、固氮量大、抗逆能力强的优点，可以提高土壤肥力和为人畜提供蛋白质营养。研究根瘤菌与豆科植物的共生固氮作用，有利于实现农业、环境和生态可持续利用与发展。接种根瘤菌是提高豆科作物生产的重要措施。国内外大量试验证明，接种根瘤菌在多数土壤中可以提高豆科作物的产量和品质（李力曹等，2000；李友国等，2002）。 Bohlool 在总结多种作物在多年接种根瘤菌效果时指出，豆科作物接种根瘤菌的产量比不接种根瘤菌提高 89.5% （Bohlool et al., 1973）。

花生是重要的豆科作物，也是我国主要的油料作物。根瘤菌和花生根系能够形成根瘤进行共生固氮，为花生生长提供氮素。接种高效根瘤菌，是促进花生共生固氮，改善花生氮素营养的重要措施。然而，目前还缺乏成熟有效的花生高效固氮根瘤菌剂。本研究利用来自不同生长区的花生品种进行盆栽、大田试验，从其根瘤中分离、纯化高效固氮根瘤菌；然后利用 PCR 技术对纯化的根瘤菌进行鉴定，并通过16s rDNA技术进行测序鉴定；在温室利用回接的方法验证宿主专一性及根瘤固氮酶活性，最后在大田试验筛选适宜南方酸性土壤生长的花生高效根瘤菌菌株，并根据土壤养分特性配制花生高效根瘤菌菌剂。研究结果将对花生高产高效生产提供实际有效的技术支撑。

发明内容

本发明的目的在于提供一种根瘤菌，该菌株系是慢生根瘤菌属的新菌株系，具有结瘤率高和固氮能力强的特点。

本发明的另一个目的是利用上述根瘤菌株，将其应用在豆科植物花生农业生产上，通过提高花生的生物固氮能力，促进生长达到花生生产中减肥增效的目的。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案来实现的：

一种根瘤菌YZM0144菌株（即福农4号），于2018年4月19日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M2018217，中国典型培养物保藏中心的地址为中国，武汉，武汉大学。

其16s rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

分离得到的根瘤菌YZM0144菌株在菌落形态上，为慢生型，圆形较小、乳白色、半透明、粘质较多。在 YMA 平板上生长5～7天后的直径为 0.8～2.0 mm