[发明专利]玉米事件DP-004114-3及其检测方法有效
申请号: | 201811462556.7 | 申请日: | 2013-03-28 |
公开(公告)号: | CN109468314B | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
发明(设计)人: | C.M.阿拉孔;M.C.哈蒙;M.A.帕斯夸尔;J.C.雷吉斯特三世;C.J.塞隆格;J.K.杨;C.X.钟 | 申请(专利权)人: | 先锋国际良种公司;纳幕尔杜邦公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 翟建伟;杨戬 |
地址: | 美国依*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 玉米 事件 dp 004114 及其 检测 方法 | ||
1.一种扩增子,其由选自SEQ ID NO: 32、SEQ ID NO: 35及其全长互补序列的核酸序列组成。
2.一种在包含玉米核酸的生物学样品中检测对于玉米事件DP-004114-3为独特的核酸分子的存在的方法,其中所述方法包括使所述样品与第一引物对或第二引物对接触,其中所述第一引物对由SEQ ID NO: 29和SEQ ID NO: 30组成,并且其中所述第二引物对由SEQID NO: 33和SEQ ID NO: 34组成,进行核酸扩增反应,和检测由所述扩增反应产生的权利要求1的扩增子。
3.根据权利要求2所述的方法,其中所述生物学样品包含转基因玉米事件DP-004114-3的植物、组织或种子。
4.根据权利要求2所述的方法,其中使用SEQ ID NO: 31的探针检测所述扩增子。
5.根据权利要求2所述的方法,其中所述生物学样品选自玉米粉、玉米粕、玉米浆、玉米油、玉米淀粉及经完全或部分地加工以含有玉米副产物的谷类物。
6.一种确定生物学样品中包含玉米事件DP-004114-3的玉米植物的DNA接合性的方法,所述方法包括:
(a) 使所述样品与选自SEQ ID NO: 29和30的引物对、或选自SEQ ID NO: 33和34的引物对接触,使得
(1) 当在包含玉米事件DP-004114-3 DNA的核酸扩增反应中使用时,产生判定玉米事件DP-004114-3的第一扩增子,并且
(2) 当在包含除DP-004114-3 DNA之外的玉米基因组DNA的核酸扩增反应中使用时,产生判定除DP-004114-3 DNA之外的玉米基因组DNA的第二扩增子;
(b) 进行核酸扩增反应;以及
(c) 检测如此产生的所述扩增子,其中检测到两种扩增子的存在指示所述样品是对玉米事件DP-004114-3 DNA杂合的,其中仅检测到所述第一扩增子指示所述样品是对玉米事件DP-004114-3 DNA纯合的。
7.一对多核苷酸引物,其包含第一多核苷酸引物和第二多核苷酸引物,其中所述第一多核苷酸引物由SEQ ID NO:29的核苷酸序列及其互补序列组成;并且所述第二多核苷酸引物由SEQ ID NO: 30的核苷酸序列及其互补序列组成,所述多核苷酸引物在样品中存在DP-004114-3 DNA模板的情况下一起发挥作用以产生判定事件DP-004114-3的扩增子。
8.一种试剂盒,其用于检测对于事件DP-004114-3为独特的核酸,所述试剂盒包含由SEQ ID NO: 29和30、或SEQ ID NO: 33和34、及其互补序列组成的引物对,所述序列在核酸检测方法中充当引物对,并且在扩增或杂交于样品中的靶核酸序列接着检测所述靶序列的扩增子或与所述靶序列的杂交时,判定所述样品中对于事件DP-004114-3为独特的核酸序列的存在。
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