[发明专利]从南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷类化合物的方法

权利要求书

1.一种从南山茶中提取山奈酚葡萄糖苷类化合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤:

A.将南山茶饼经过浸提处理得到样品液；所述浸提处理的方法为：用体积分数为50-60％的乙醇水溶液浸提，料液比为1kg所述南山茶饼对应2-4L所述乙醇水溶液，在60-70℃加热回流浸提2-4次，过滤、合并得到提取液；然后减压浓缩，再用正丁醇萃取得到萃取液，加水稀释18-22倍得到所述样品液；

B.将所述样品液湿法上样至大孔树脂层析柱，用乙醇水溶液体系进行梯度洗脱，收集含有第一目标化合物和第二目标化合物的洗脱液，经后处理得粗组分液；所述大孔树脂层析柱的制备方法为：先用乙醇浸泡D101大孔树脂，然后装柱，依次用乙醇、水冲洗至无乙醇味；所述乙醇水溶液体系为：体积分数为5％、15％、50％、95％的乙醇水溶液；所述大孔树脂层析柱的柱体积BV1为10L，所述5％乙醇水溶液的用量为6倍BV1、所述15％乙醇水溶液的用量为8倍BV1、所述50％乙醇水溶液的用量为8倍BV1、所述95％乙醇水溶液的用量为4倍BV1；收集用所述15％乙醇水溶液洗脱的洗脱液；所述后处理为：将洗脱液减压蒸馏除去乙醇，然后用第二C18ME色谱柱、以甲醇作为流动相进行洗脱做DAC富集，接收流出液减压浓缩直至无液体旋出，用体积比为1:1的甲醇和丙酮溶解得所述粗组分液；所述第二C18ME色谱柱规格为：100A，50mm×250mm，10μm；

C.将所述粗组分液湿法上样至聚酰胺树脂层析柱，依次用蒸馏水、体积分数为20％、40％、90％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，经色谱检测，收集含有所述第一目标化合物和所述第二目标化合物的洗脱液，浓缩冻干得到粗提取物；所述聚酰胺树脂层析柱的柱体积BV2为1L；所述蒸馏水、所述体积分数为20％乙醇水溶液、所述40％乙醇水溶液的用量均为5倍BV₂、所述90％乙醇水溶液的用量为2倍BV₂；所述梯度洗脱过程中，每500mL为一个收集单位，并顺次编号，收集第19-22号洗脱液；

D.将所述粗提取物用溶剂溶解后进样，使用第一C18ME色谱柱进行HPLC半制备，用乙腈-甲酸水溶液作为流动相进行等度洗脱，收集含有所述第一目标化合物的第一流份段，浓缩冻干得到所述第一目标化合物；收集含有所述第二目标化合物的第二流份段，浓缩冻干得到所述第二目标化合物；所述第一C18ME色谱柱规格为：100A，20mm×250mm，10μm；所述乙腈-甲酸水溶液中乙腈与甲酸水溶液的体积比为19:81，所述甲酸水溶液的体积分数为0.1％；所述溶剂为所述乙腈-甲酸水溶液；所述第一目标化合物的结构式为：

所述第二目标化合物的结构式为：