[发明专利]一种庆大霉素B纯度的离子色谱检测方法

说明书

本发明提供了一种庆大霉素B纯度的离子色谱检测方法，其色谱条件为：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温25～35℃；流速0.5～1.5ml/min；进样量10～20μl；本方法采用金指示剂电极、银氯化银参比电极和不锈钢辅助电极作为电池体的脉冲安培检测器，根据仪器使用的脉冲持续时间，分别在+0.05V、氧化电位为+0.75V和还原电位为‑0.15V时进行检测。本发明具有操作简单快速、准确度高、精密度高的优点，适合实验室对于庆大霉素B纯度的检测工作，可批量进行检测，提高检测效率。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体而言，涉及一种庆大霉素B纯度的离子色谱检测方法。

背景技术

庆大霉素B(gentamicinb)是一种碱性水溶性抗生素，属氨基糖苷类。系由小单孢菌所产生，抗菌谱与链霉素相似，但抗菌活性较链霉素、卡那霉素强。其与庆大霉素相比具有较低的肾毒性和耳毒性及对某些耐药性菌(如具有2-乙酰化钝化酶的耐药菌)有抵抗能力；同时以其为原料可合成硫酸异帕米星。

通过查阅大量中外文献及专利，目前还没有发现通过类似离子色谱的方法来测定庆大霉素B的纯度的文献报道，不利于企业对产品质量的把控，所以目前亟需一种有效测定庆大霉素B纯度的分析方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种庆大霉素B纯度的离子色谱检测方法，该方法具有操作方便、快速、准确度高、精密度高、专属性强的优点，适合实验室对于庆大霉素B纯度的检测工作，可批量进行检测，提高检测效率；满足了研发和生产的需求。

为实现上述发明目的，本发明提供了一种庆大霉素B纯度的离子色谱检测方法。该检测方法包括以下步骤：

(1)色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，规格为4.6mm×250mm，5μm柱，柱温25～35℃，流速0.5～1.5ml/min，进样量10～20μl；

流动相为氢氧化钠溶液、乙腈和水制成的空白溶液；

所述氢氧化钠溶液为900ml水中加入5.0ml三氟乙酸和5.0ml无碳酸盐，用稀释25倍的无碳酸盐将氢氧化钠溶液调节pH至3.0～5.0；在所述氢氧化钠溶液中加入10ml乙腈并用水稀释至1000ml即得空白溶液；

(2)系统适用性溶液的制备：

分别称取庆大霉素C1a对照品和硫酸西索米星对照品，加所述流动相溶解并稀释制成每1ml中各含0.02mg的混合溶液，作为系统适用性溶液；

(3)灵敏度溶液的制备：

称取硫酸西索米星对照品，加所述流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.001mg的溶液；

(4)供试品溶液的制备：

称取庆大霉素B供试品，用流动相溶解并稀释制成每1ml中含0.2mg庆大霉素B的溶液；

(5)限度溶液的制备：

量取所述供试品溶液，用所述流动相稀释定容至刻度，制成每1ml中含0.1μg庆大霉素B的溶液，作为限度溶液；

(6)离子色谱检测方法：

分别吸取系统适用性溶液、空白溶液、供试品溶液各10～20μl，注入离子色谱仪进行测定，得到色谱图；根据色谱图，采用峰面积归一化法计算庆大霉素B的纯度。

在一些实施方式中，流动相的pH为4.0。

在一些实施方式中，色谱柱的温度为30℃。

在一些实施方式中，进样量为20μl。

在一些实施方式中，流速为1.0ml/min。