[发明专利]一种多粘类芽孢杆菌、应用及微生物菌剂、粉剂和颗粒剂

说明书

本发明提供了一种多粘类芽孢杆菌、应用及微生物菌剂、粉剂和颗粒剂，其从玉米茎中分离得到，该菌株对多种植物真菌病害，尤其是禾谷镰孢、层出镰孢或拟轮枝镰孢等真菌病害具有良好的防治效果，不污染环境，生态安全，遗传稳定，且不容易产生抗性；本发明可以与植物生长所需有机、无机营养成分混合制备成微生物菌剂灌根、粉剂拌种以及颗粒剂，使作物的抗真菌病害能力明显增强。

技术领域

本发明涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种多粘类芽孢杆菌、应用及微生物菌剂、粉剂和颗粒剂。

背景技术

植物的病害大约70％是由真菌引起的，无论是植物生长的任何时期都有可能被真菌感染，尤其是粮食作物，一旦被植物病原真菌侵染，可能产生多种毒素，最终危害人类的健康。随着农药的使用，植物真菌的抗药性增强，导致真菌泛滥。植物内生菌在生物防治方面的利用，可减少化学农药的使用，进而减少对环境的污染，并且植物内生菌在生态的内环境中起到重要的作用，引起学者的重视。利用有益微生物防治植物病害始于1921年的Hartely利用真菌防治碎倒病(王晓宇，中国农业科学，2011)。

多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)可产芽孢，较耐温，属革兰氏阳性菌，其细胞多为杆状，以鞭毛运动，生理生化反应多样，对大多数植物真菌病害有防控作用，对植物本身的致病力小，可用于生物防治方面。近年来，多粘类芽孢杆菌由于其显著的植物促生效果，已被普遍认为是一种植物根际促生细菌，可增加产量，产生多种活性物质，有拮抗蛋白类和抗生素类等。多粘类芽孢杆菌还具有抗氧化性、酶活、降脂等活性。

但是目前己知的多粘类芽孢杆菌对植物真菌病害的防治作用大多效果不佳、作用对象比较单一、易受自然环境影响、竞争存活能力有限等弊端。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种多粘类芽孢杆菌、应用及微生物菌剂、粉剂和颗粒剂，其从玉米茎中分离得到，该菌株对多种植物真菌病害具有良好的防治效果，遗传稳定，且不容易产生抗性。

本发明为达到上述目的，采用的技术方案如下：

本发明从玉米茎中分离得到一株多粘类芽孢杆菌L10，经鉴定，其为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。

其鉴定过程如下：L10菌株在LB固体培养基上生长，其菌落呈白色、圆形，较小，表面光滑、湿润，粘稠，不易挑起。显微观察菌体为单细胞，杆状，革兰氏染色阳性，芽孢椭圆形。利用生理生化指标对其进行鉴定后发现，其淀粉水解、明胶水解、6.5％NaCl、V-P测定等呈阳性；接触酶、甲基红试验等呈阴性。然后利用分子生物学手段采用16S rDNA基因特异引物对16S rDNA进行扩增，将扩增产物回收并测序，将测序结果进行Blast分析，结果发现与菌株L10高度同源的菌株为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)，同源性99％，并结合生理生化特征，鉴定其为多粘类芽孢杆菌属。

作为本发明的第二方面，多粘类芽孢杆菌L10在防治植物真菌病害领域的应用。

进一步的，所述植物真菌病害的真菌病原体为镰刀菌(Fusarium)。

进一步的，所述镰刀菌为禾谷镰孢(Fusarium graminearum)、层出镰孢(Fusariumproliferatum)、拟轮枝镰孢(Fusarium verticilliodes)。

作为本发明的第三个方面，提供了一种多粘类芽孢杆菌制备的微生物菌剂，采用如下方法制备：将多粘类芽孢杆菌L10在在牛肉膏蛋白胨液体培养基中培养，培养温度为28℃，培养时间为18h，转速为150rpm，发酵液离心后，将菌体用生理盐水悬浮，调节液细胞数为108cfu/mL，即制得微生物菌剂，所述生物菌剂用于灌根。