[发明专利]一种海菖蒲高抗氧化活性提取物的制备方法

说明书

本发明提供一种海菖蒲高抗氧化活性提取物的制备方法，包括以下步骤：首先制备海菖蒲根茎粉末和/或叶粉末原料，加入纤维素酶液，混匀，水浴酶解，得酶解液；在酶解液中加入无水乙醇，微波提取，重复提取，合并上清液，浓缩，得浓缩液；在浓缩液中加入乙醇溶液，混匀，静置，取上清液，浓缩；冷冻干燥，获得乙醇粗提物；用蒸馏水将乙醇粗提物进行加热溶解；用等体积乙酸乙酯进行萃取，合并萃取液，浓缩，冷冻干燥；即得目标提取物。本发明从海菖蒲提取的化合物，对DPPH自由基和羟自由基具有较高的清除率，可作为天然抗氧化剂使用。

技术领域

本发明涉及海菖蒲技术领域，特别涉及一种海菖蒲高抗氧化活性提取物的制备方法。

背景技术

海草是全球海洋中唯一的一种单子叶被子植物，据文献记录，全球海草共有5科12属72种，中国除波喜荡属(Posidonia)和根枝草属(Amphibolis)无记录外，共有4科10属22种海草。海洋中，大面积分布的连片海草称为海草床。海草床是和红树林、珊瑚礁齐名的三大典型海洋生态系统之一，不但是许多海洋生物的栖息地和食物源，而且具有巩固、防护海床底质和海岸线等生态功能，对维持近岸海洋生态系统的良性循环有着非常重要作用。因此，多年来，国内外学者对海草的研究主要集中在海草的资源分布、生产力与生物多样性和生境特征等方面，而对海草化学成分的研究相对较少。海草化学成分的研究工作起于上世纪70年代初，随后的研究表明，海草由于生境的特殊性，长期处于高盐、高压环境，体内含有许多结构特异的黄酮类化合物，且多数具有抗菌、抗虫、抗肿瘤、抗病毒和抗氧化等生物活性，在新型天然食品、药品以及化妆品的开发应用上具有广阔前景。海菖蒲是我国南海海域海草床的一种大型、广布性海草种，有着极其丰富的自然资源。目前海菖蒲提取物的利用价值不高，应用受限，急需提供一种新方法，解决上述技术问题。

发明内容

鉴以此，本发明提出一种海菖蒲高抗氧化活性提取物的制备方法，解决上述技术问题。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种海菖蒲高抗氧化活性提取物的制备方法，包括以下步骤:

S1、原料的制备：取海菖蒲全草，蒸馏水清洗，自然阴干，干燥，反复返潮去盐，再干燥，根茎和叶分开粉碎，过筛备用；

S2、水浴酶解：取海菖蒲根茎粉末和/或叶粉末原料，加入纤维素酶液，混匀，水浴酶解，得酶解液；

S3、微波提取：在酶解液中加入无水乙醇，微波提取，控制微波功率450～550W，提取温度35～45℃，提取时间3～5min，重复提取2～4次，合并上清液，浓缩，得浓缩液；

S4、低温分离：在浓缩液中加入乙醇溶液，混匀，于3～5℃静置8～16h，取上清液，浓缩；冷冻干燥，获得乙醇粗提物；

S5、萃取：用蒸馏水将乙醇粗提物进行加热溶解；用等体积乙酸乙酯进行萃取，萃取2～4次，合并萃取液，浓缩，冷冻干燥，即得目标提取物。

进一步的，S1步骤中，所述返潮去盐操作包括将干燥后的海菖蒲原料置于环境湿度70-90％条件下，使原料中的盐分自然析出。

进一步的，S1步骤中，所述干燥操作包括置于50～70℃烘箱进行烘干；所述过筛目数为60目。

进一步的，S2步骤中，所述纤维素酶液的浓度为0.1～0.3mg﹒ml^-1。

进一步的，S2步骤中，其纤维素酶液中纤维素酶与原料质量比为1：4～6。

进一步的，S2步骤中，所述纤维素酶液的浓度为0.2mg﹒ml^-1。

进一步的，S2步骤中，水浴酶解温度为40～45℃，酶解时间为80～100min。

进一步的，S3步骤中，加入无水乙醇的体积为酶解液体积的4～6倍。