[发明专利]DNA免疫吸附剂在制备抗ds-DNA抗体检测试剂中的应用

权利要求书

1.DNA免疫吸附剂在制备抗ds-DNA抗体检测试剂中的应用，其特征在于：

所述的DNA免疫吸附剂为DNA负载在二氧化硅纳米粒子上得到的DNA免疫吸附剂；

所述的二氧化硅纳米粒子为介孔二氧化硅纳米粒子；

所述的DNA为小牛胸腺DNA；

所述的DNA免疫吸附剂通过如下步骤制备得到：将二氧化硅纳米粒子表面修饰氨基和羧基，再加入催化剂和DNA混合，反应，得到DNA免疫吸附剂；

所述的抗ds-DNA抗体检测试剂是用于荧光免疫染色的抗ds-DNA抗体检测试剂；

所述的用于荧光免疫染色的抗ds-DNA抗体检测试剂通过如下步骤制备得到：将DNA免疫吸附剂分散，加入荧光显示剂，反应，离心，得到用于荧光免疫染色的抗ds-DNA抗体检测试剂。

2.根据权利要求1所述的DNA免疫吸附剂在制备抗ds-DNA抗体检测试剂中的应用，其特征在于：

所述的介孔二氧化硅纳米粒子通过如下步骤制备得到：以正硅酸乙酯为硅源，十六烷基三甲基溴化铵为表面活性剂，三乙胺为有机溶胀剂，搅拌回流反应，得到介孔二氧化硅纳米粒子。

3.根据权利要求1所述的DNA免疫吸附剂在制备抗ds-DNA抗体检测试剂中的应用，其特征在于：所述的DNA免疫吸附剂通过如下步骤制备得到：

（1）将介孔二氧化硅纳米粒子分散在有机溶剂中，加入3-氨丙基三乙氧基硅烷，搅拌，反应，离心，得到表面含氨基的介孔二氧化硅纳米粒子；

（2）洗涤步骤（1）获得的表面含氨基的介孔硅纳米粒子分散在有机溶剂中，加入丁二酸酐，反应，离心，洗涤，干燥，研磨，得到含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子；

（3）将步骤（2）获得的含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子分散，加入催化剂，搅拌，加入用于与抗DNA抗体结合的DNA溶液，反应，离心，洗涤，干燥，研磨，得到DNA负载在介孔二氧化硅纳米粒子上得到的DNA免疫吸附剂；

步骤（1）中所述的3-氨丙基三乙氧基硅烷的用量按其与所述的介孔硅纳米粒子=1～3mL:100mg配比计算；

步骤（2）中所述的丁二酸酐的用量为与所述的介孔二氧化硅纳米粒子=质量比1～4:1配比计算；

步骤（3）中所述的催化剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺中的至少一种；

所述的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的质量用量为按其与所述含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子的质量比=1:1～5计算；

所述的N-羟基琥珀酰亚胺的质量用量为按其与所述含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子的质量比=1:1～5计算；

步骤（3）中所述的DNA的质量用量为按其与所述含羧基修饰的介孔二氧化硅纳米粒子的质量比=1:10～30计算。

4.一种用于荧光免疫染色的抗ds-DNA抗体检测试剂，其特征在于：是在权利要求1中所述的DNA免疫吸附剂上标记荧光显示剂得到；

所述的DNA免疫吸附剂通过如下步骤制备得到：将二氧化硅纳米粒子表面修饰氨基和羧基，再加入催化剂和DNA，混合，反应，将用于与抗ds-DNA抗体结合的DNA溶液和二氧化硅纳米粒子混合，反应，得到DNA免疫吸附剂；

所述的用于荧光免疫染色的抗ds-DNA抗体检测试剂通过如下步骤制备得到：将DNA免疫吸附剂分散，加入荧光显示剂，反应，离心，得到用于荧光免疫染色的抗ds-DNA抗体检测试剂。

5.根据权利要求4所述的用于荧光免疫染色的抗ds-DNA抗体检测试剂，其特征在于：

所述的荧光显示剂为香豆素-6；

所述的分散为采用超纯水或磷酸盐缓冲液分散；

所述的磷酸盐缓冲液为浓度为0.01～0.1M、pH为7.2～7.4的磷酸盐缓冲液；

所述的荧光显示剂的用量按其与所述的免疫吸附剂的质量比=1:150～250配比计算；

所述的反应为避光反应；

所述的反应的时间为24 h；

所述的离心的转速为10000～15000 rpm。