[发明专利]一种犬瘟热、犬细小病毒检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种犬瘟热、犬细小病毒检测试剂盒，包括抗犬瘟热病毒单克隆抗体CD1、CD2，抗犬细小病毒单克隆抗体CP1、CP2，包被板条，铕、钐标记试剂，层析柱、洗脱液、分析缓冲液和标准品；本发明还公开了一种犬瘟热病毒、犬细小病毒的检测方法。本发明的犬瘟热、犬细小病毒检测试剂盒采用时间分辨检测技术，提高了检测灵敏度，能同时检测犬瘟热、犬细小两种疫病，给使用者提供了方便且降低了使用成本，检测的批间和批内差异小，性能稳定。

技术领域

本发明涉及病毒检测技术领域，尤其是一种犬瘟热、犬细小病毒检测试剂盒。

背景技术

随着人们生活质量的不断提高，宠物犬的饲养量也逐年增加，而犬类传染病的爆发对其造成了巨大影响，对于这些传染病的预防与控制形式也愈加严峻。在犬类疫病中，有两种烈性的传染病残害了不计其数的犬的生命，使无数爱犬的主人痛彻心扉——这就是犬瘟热和犬细小病。犬瘟热是由犬瘟热病毒(CDV)引起的一种高度接触性传染病，传染性强，死亡率可高达80％以上。病犬呈现双相热型、鼻炎、严重的消化道障碍和呼吸道炎症等特征，少数病例可发生脑炎。感染的自然宿主为犬科和鼬科动物，主要通过空气和飞沫水平传播。近年来，在食肉目、偶蹄目猪科、灵长目的猕猴属和鳍足目海豹科等均有CDV自然发病的报道，甚至也有人感染CDV的病例。犬细小是由犬细小病毒(CPV)感染幼犬所引起的一种急性传染病，经粪便、尿液、唾液和呕吐物向外界传播，临床上有两种表现型，出血性肠炎型以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显著减少为主要特征；心肌炎型则以突然死亡为特征，这两种类型疾病均具有发病率高、死亡率高和传染性强的特点。犬瘟热和犬细小的发病率和死亡率都较高，需要快速检测，做到早诊断、早隔离、早防治才能达到好的治疗效果。

而市面上流行的试剂盒往往只能检测犬瘟热或犬细小，使用2个试剂盒进行检测无形中增大了工作量，提高了成本。市场上现有的检测犬瘟热和犬细小病毒的试剂盒有化学发光法、胶体金法和ELISA法，其中，化学发光法需配套大型的仪器，难以实现床旁检测；传统的胶体金法，无法定量，且检测灵敏度低；ELISA法可以实现定量检测，但灵敏度仍无法满足对病程、治疗、预后的动态检测。

发明内容

基于上述问题，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种犬瘟热、犬细小病毒检测试剂盒，该试剂盒能同时检测犬瘟热、犬细小病毒，方便快捷，可以对病毒定量，检测灵敏度高，节约成本。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种犬瘟热、犬细小病毒检测试剂盒，包括抗犬瘟热病毒单克隆抗体CD1、CD2，抗犬细小病毒单克隆抗体CP1、CP2，包被板条，铕、钐标记试剂，层析柱，洗脱液，分析缓冲液和标准品。需要说明的是，本试剂盒中抗犬瘟热病毒单克隆抗体包括但不限于抗犬瘟热病毒血凝素H蛋白的单克隆抗体CD1和CD2，还包括能靶向结合犬瘟热病毒血凝素H蛋白的其它单克隆抗体，只要该单克隆抗体特异性强、亲和力高即可；类似地，本试剂盒中抗犬细小病毒单克隆抗体包括但不限于抗犬细小病毒VP2蛋白的单克隆抗体CP1和CP2，还包括能靶向结合犬细小病毒VP2蛋白的其它单克隆抗体，只要该单克隆抗体特异性强、亲和力高即可。其中单克隆抗体CD1和CD2的亲和力可以相同，也可以有差异，但是对血凝素H蛋白的亲和力差异不得超过10％；同样地，单克隆抗体CP1和CP2的亲和力可以相同，也可以有差异，但是对VP2蛋白的亲和力差异不得超过10％，以免导致检测误差。

优选地，铕、钐标记试剂为Eu³⁺和Sm³⁺标记试剂盒。

优选地，所述层析柱为Sephadex G-50层析柱。

优选地，所述分析缓冲液为Tris-HCl、NaCl、BSA、Tween-20和NaN₃的混合溶液。