[发明专利]基于戊二醛交联作用的丝素固定化DNA吸附剂制备方法及其在黄曲霉毒素消除中的应用

权利要求书

1.一种基于戊二醛交联作用的丝素固定化DNA吸附剂制备方法，其特征在于：该方法先通过化学交联，即通过戊二醛分子与氨基交联，将天然DNA固定到丝素上，制备新型丝素固定化DNA。

2.根据权利要求1所述的基于戊二醛交联作用的丝素固定化DNA吸附剂制备方法，其特征在于：按照天然DNA与丝素的质量比为：0.5-1∶10计，所述丝素是丝素纤维或是丝素蛋白，将天然DNA和丝素加入含0.2-2wt%戊二醛的pH为6-8的磷酸缓冲液中，充分混匀，并在4-40℃下反应0.5-2小时，反应结束后若为丝素纤维与DNA反应物则直接用蒸馏水反复漂洗，得到丝素固定化DNA；反应结束后若为丝素蛋白与DNA反应物则先加入甲醇使丝素蛋白凝固成水不溶物，再用蒸馏水反复漂洗，得到丝素固定化DNA。

3.根据权利要求2所述的基于戊二醛交联作用的丝素固定化DNA吸附剂制备方法，其特征在于：所述丝素纤维的制备过程是按照传统方法进行：即将干燥蚕丝纤维加入0.5％碳酸钠溶液，蚕丝纤维与碳酸钠溶液的质量比为1：15-20，在沸水浴中处理0.5小时完成一次脱胶步骤，重复3次脱胶步骤，最后得到白色丝状物即为丝素纤维，用蒸馏水反复漂洗，即精制丝素纤维。

4.根据权利要求3所述的基于戊二醛交联作用的丝素固定化DNA吸附剂制备方法，其特征在于：所述丝素蛋白的制备过程是：精制丝素纤维用CaCl₂、Ca(NO₃)₂或LiBr溶解，通过调节相关盐的浓度、溶解温度、溶解时间调控蚕丝纤维的溶解程度和丝素蛋白分子量，并通过透析脱盐后制成浓度15-50%的丝素蛋白溶液，或干燥备用。

5.根据权利要求1-4任一项所述的基于戊二醛交联作用的丝素固定化DNA吸附剂制备方法，其特征在于：所述天然DNA是小牛胸腺DNA、鲱鱼精DNA、鲑鱼精DNA、酵母DNA或花椰菜DNA。

6.一种基于戊二醛交联作用的丝素固定化DNA吸附剂在黄曲霉毒素消除中的应用，其特征在于：通过丝素固定化DNA上的DNA与黄曲霉毒素发生嵌合作用后，再分离清除丝素固定化DNA而消除油脂或是乳制品中的黄曲霉毒素；所述丝素固定化DNA是权利要求1-5任一项制备得到的丝素固定化DNA。

7.根据权利要求6所述的基于戊二醛交联作用的丝素固定化DNA吸附剂在黄曲霉毒素消除中的应用，其特征在于：丝素固定化DNA对油脂中黄曲霉毒素去除的具体过程为：

（1）将丝素固定化DNA溶于或分散到由磷酸盐、甘氨酸、氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠构成的不同缓冲液中，得到丝素固定化DNA缓冲溶液，丝素固定化DNA缓冲溶液的pH值控制在7-10范围，离子强度控制在50mM-200mM范围，DNA浓度控制在0.5-5%范围；

（2）对黄曲霉毒素污染油脂样品预先进行黄曲霉毒素含量检测；

（3）按照1克DNA嵌入结合100微克-800微克黄曲霉毒素的比例计算，将步骤（1）配制的丝素固定化DNA缓冲溶液添加到油脂中，向油脂中添加与步骤（1）相同的缓冲液作为水洗液，使油脂中缓冲液总量为油脂总重量的5-10%；

（4）充分混合，混合时间维持30分钟-60分钟，温度维持在50℃-70℃；

（5）处理之后，在室温下静置30分钟-120分钟，然后经油水分离器或高速离心分离油水，得油脂；

（6）所得油脂再经纯净水洗涤1-2次，洗涤水添加量占油脂质量的5%-10%，充分混合，混合时间维持30分钟-60分钟，温度维持在50℃-70℃，在室温下静置30分钟-120分钟，然后经油水分离器或高速离心分离油水，得精制油脂。

8.根据权利要求6所述的基于戊二醛交联作用的丝素固定化DNA吸附剂在黄曲霉毒素消除中的应用，其特征在于：丝素固定化DNA对乳制品中黄曲霉毒素去除的具体过程为：对黄曲霉毒素污染乳制品样品预先进行黄曲霉毒素含量检测，并按照丝素固定化DNA中1克DNA嵌入结合100微克-800微克黄曲霉毒素的比例计算，将丝素固定化DNA添加到受黄曲霉毒素污染的乳制品中，在4℃-30℃下充分混合，混合时间维持30分钟-60分钟，处理之后，在4℃-30℃下静置30分钟-120分钟，然后通过过滤去除丝素固定化DNA，得精制乳制品。