[发明专利]一种分析卵泡液代谢物与卵母细胞质量之间关系的方法

说明书

本发明涉及一种分析卵泡液代谢物与卵母细胞质量之间关系的方法，其特征在于，所述方法包括比较卵巢储备功能低下受试者与健康受试者的卵泡液代谢物的组成。本发明通过代谢组学分析，筛选特征生物标志物，明确卵泡液代谢标志物组与卵母细胞质量间关系，建立了更加客观的、无创的卵母细胞质量评估方法。

技术领域

本发明涉及生殖医学领域，具体涉及分析卵泡液代谢物与卵母细胞质量之间关系的方法。

背景技术

我国不孕症患者目前已经占到育龄人口的12.5％，人数已经超过4000万，并呈现出快速增长的趋势。辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)为不孕症患者带来了诞生新生命体的希望，然而在体外受精(in vitro fertilization,IVF)中，近80％的胚胎着床失败，为提高成功率，各生殖中心进行多胚胎移植，由此多胎妊娠随之增加，而多胎妊娠出生的新生儿早产、死产、低出生体重、出生缺陷及母亲高血压等并发症均较自然受孕高。因此，准确预测卵母细胞的发育潜能，挑选出优质卵母细胞进行IVF，进而选出单个胚胎进行移植对提高IVF妊娠结局、孕育健康子代具有重大意义。

目前形态学方法是评估卵母细胞发育潜能最常用的方法，主要采取卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)形态、第一极体形态、卵周隙大小、胞质形态、纺锤体形态学等判断卵母细胞质量。形态学方法无创、方便，但缺乏最合适的统一标准，不能准确反映卵母细胞的功能状态，且受观察者主观影响较大，观察者间的主观性使卵母细胞与胚胎发育的关联显示出差异性。因此，寻找一种更为客观、精准的卵母细胞质量评估方法迫在眉睫。

卵泡液构成卵母细胞生长、发育的微环境，卵母细胞在卵泡中的时间占据从生长到成熟时程的99％以上。研究表明卵泡液内含有生物活性代谢物和蛋白质等，可能影响卵泡生长、卵母细胞质量与受精以及胚胎的发育，因此卵泡液生物标志物最能够间接反映卵母细胞的质量。通过ART取得卵母细胞后，卵泡液的一半作为废弃物而丢弃，这部分卵泡液可以作为用于评估所收集的卵母细胞质量优劣的丰富的资源。据此，运用组学技术研究卵泡液内含物，并筛选出特征标志物，将为建立一种客观、精准、无创性的卵母细胞质量评估方法奠定基础。

代谢组学是继基因组学、转录组学、蛋白质组学之后新兴起的一门科学，是系统生物学的重要组成部分。Nicholson等于1999年首次提出代谢组学概念:对受病理生理刺激或基因改变的生物体系所反应的动态代谢进行多参数定量分析。它以组群指标分析为基础，以高通量检测和数据处理为手段，以信息建模与系统整合为目标，定量分析特定时期特定生理条件下细胞体系中所有的代谢物。代谢物组即指生物样本中所有的小分子代谢物，包括代谢中介物及终产物，如氨基酸、脂类、核肽、ATP等，它是细胞调节过程的终产物，理化特性广泛，反映生物体系受外部刺激所做出的变化。

代谢组学具有如下特点:首先，与细胞或机体的基因和蛋白质相比，代谢物数量显著少，人类基因组大约包含2.5万个基因，编码10万-20万个转录子，翻译100万种蛋白质，却仅产生2500-3000种代谢物，故代谢组检测要比转录组或蛋白组检测简单廉价。其次，转录组及蛋白组的改变并不总是与细胞表型相关，而代谢物组是基因表达的终产物，反映了细胞的真实功能状态，可较前者更准确地评估基因功能。最后，基因过度表达等微小变化经转录组和蛋白组逐级放大后，在代谢物水平上更易被检测。因此，代谢组学从筛选难易程度上更具优势，是良好的、潜在的卵泡液内特征标志物筛选方法。

发明内容

根据本发明，提供一种分析卵泡液代谢物与卵母细胞质量之间关系的方法，所述方法包括比较卵巢储备功能低下受试者与健康受试者的卵泡液代谢物的组成。

其中，所述方法还包括比较卵巢储备功能低下受试者与健康受试者的卵泡液代谢物的含量。