[发明专利]一种复合菌制剂的生产方法及其在污水处理中的应用

说明书

本发明提供一种复合菌制剂的生产方法及其在污水处理中的应用，具体地，所述复合菌制剂包括转基因海洋兼性芽孢杆菌25份、趋磁细菌9份、棒状美丽盐菌2.5份、解淀粉盐颗粒型菌3.8份、盐生枝芽胞杆菌2.5份、运动节枝杆菌5份、盐反硝化枝芽孢杆菌6.5份、反硝化卡斯特兰尼氏菌2份，本发明提供的复合菌制剂除具备耐盐特性还同时具有较强的硝氮、氨氮去除效果，适用于高盐废水的处理。

技术领域

本发明涉及污水处理领域，特别地涉及一种复合菌制剂的生产方法及其在污水处理中的应用。

背景技术

海水的盐度在3％左右，工业上把盐度和海水相当甚至超过海水的废水称为高盐废水。纺织印染、化工生产过程、食品加工以及农药生产过程中都会排放大量的高盐废水。目前对高盐废水的处理可分为物理化学法和生物法两大类，由于此类废水的溶解性有机物含量高，一般物理、化学方法难以处理并且处理成本高，而生物法具有经济、高效、无害的特点，是首选的处理方法。

高盐废水中所含大量的氯离子，会对微生物的生长产生抑制，使微生物细胞脱水；使脱氢酶活性降低，对细胞产生毒害作用；同时由于水的密度增加，活性污泥容易上浮流失。这些对高盐废水的传统生化处理产生了不利的影响。普通活性污泥通过一定时间的耐盐驯化可用于处理高盐废水，但是驯化周期长，耐冲击负荷能力弱，处理效果无法满足实际需求。

目前筛选出的耐盐微生物多为针对COD降解的功能菌株，缺乏针对氨氮，特别是硝氮去除的耐盐硝化菌和耐盐反硝化菌。本发明提供一种复合菌制剂的生产方法及其在污水处理中的应用，所述复合菌制剂具有高耐盐特性，并具有较强的硝氮、氨氮去除效果，适用于高盐废水的处理。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种复合菌制剂的生产方法及其在污水处理中的应用。

本发明是以如下技术方案实现的：

本发明具有以下有益效果：本发明提供一种经基因改造获得具有高耐盐特性的细菌，并使该细菌同时具有较强的硝氮、氨氮去除效果，适用于高盐废水的处理，并将上述细菌与其他菌种制成新型水凝胶载体复合菌制剂，所述水凝胶载体复合菌制剂系统体积小，相对有效生物量大，储存条件要求低，在实际应用时，现场定量可根据污水量进行水凝胶载体复合菌制剂系统的叠加，便于操作，适用于多种高盐污染场景。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明作进一步地详细描述。

实施例1：获得耐盐基因

地中海富盐菌(Haloferax mediterranei)菌株购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号CGMCC1.3716。前期研究证明该菌具有较强的耐盐性，虽然其具有较强的除盐作用，但是其不易培养并且不具备除碳、除硫、除氨氮等功能，不能直接应用于高盐废水的处理中。

为了挖掘地中海富盐菌的耐盐相关基因，探索其耐盐的分子机制，提取其基因组DNA进行全基因组测序，基因组测序委托南京金斯瑞公司通过SOLEXA测序平台完成，利用大肠杆菌表达系统(E.coli DH5a)构建盐胁迫后地中海富盐菌的cDNA文库，具体方法为：分别利用超声随机打断基因组DNA至250bp、500kb、1.0kb、1.5kb的片段，将DNA片段与接头连接，之后250bp和500bp文库进行PCR扩增，上机测序，1.0kb和1.5kb大片段文库采用Cre-LoxRecombination建库技术构建，在DNA大片段两端连接LoxP接头后再进行环化、测序；按照基因组构建步骤分别构建插入片段为250bp，500bp，1.0kb，1.5kb的片段插入文库。