[发明专利]一种杰米拉类芽孢杆菌高密度发酵方法有效
申请号: | 201811401672.8 | 申请日: | 2018-11-22 |
公开(公告)号: | CN109251879B | 公开(公告)日: | 2020-09-18 |
发明(设计)人: | 范建龙;林存銮;邱森森;谢微 | 申请(专利权)人: | 青岛中达农业科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人: | 韩百翠 |
地址: | 266316 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 杰米拉类 芽孢 杆菌 高密度 发酵 方法 | ||
1.一种杰米拉类芽孢杆菌高密度发酵方法,其特征是,将杰米拉类芽孢杆菌活化后,经摇瓶一级种子液制备、种子罐二级种子液制备和发酵培养,当发酵液中90%以上菌体转化为芽孢时,停止发酵;
所述杰米拉类芽孢杆菌为杰米拉类芽孢杆菌ZDC-04,该菌株保藏号为CGMCCNo.16231;
所述摇瓶一级种子液制备采用的摇瓶一级种子培养基为:蛋白胨10±2g/L、酵母提取物10±2g/L、蔗糖30±5g/L,pH 6.5±0.1;
所述种子罐二级种子液制备采用的种子罐二级种子培养基为:玉米粉20±5g/L、豆粕粉15±3g/L、蔗糖30±5g/L、磷酸二氢钾5±1g/L,pH 6.5±0.1;
所述发酵培养采用的发酵培养基为:玉米粉12-30g/L,豆粕粉5-17g/L,麸皮5-14g/L,蔗糖6-12g/L,碳酸钙1-5g/L,磷酸二氢钾1-6g/L,氯化钠0-5g/L,初始pH值为6.4-7.4;
所述发酵培养的培养条件为:按5%的接种量将种子罐二级种子液接入50L发酵罐中,发酵罐装液量30L;发酵第0-10h,培养条件为:温度30±0.1℃、搅拌转速400r/min、通气量3m3/h,罐压0.03-0.05Mpa;发酵11h之后的发酵培养条件:温度30±0.1℃、搅拌转速300r/min、通气量1m3/h,罐压0.05Mpa。
2.如权利要求1所述的一种杰米拉类芽孢杆菌高密度发酵方法,其特征是,所述发酵培养基为:玉米粉15g/L,豆粕粉10g/L,麸皮8g/L,蔗糖6g/L,碳酸钙5g/L,磷酸二氢钾5g/L,氯化钠2g/L、初始pH值为6.4-7.4。
3.如权利要求1所述的一种杰米拉类芽孢杆菌高密度发酵方法,其特征是,所述摇瓶一级种子液制备、种子罐二级种子液制备为:
(1)摇瓶一级种子液制备:将活化后的杰米拉类芽孢杆菌转入摇瓶一级种子培养基,在温度为28-37℃下摇床培养16-30h;
(2)种子罐二级种子液制备:将培养好的摇瓶一级种子液按接种量1-5%转接入种子罐二级种子培养基中,于温度30±2℃下培养14-18h。
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