[发明专利]一个烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5及其应用

权利要求书

1.烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5的编码基因NtSLAH5基因在烟草中的应用，其特征在于，将该基因沉默后，植物体内氯离子含量明显下降；

所述烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5的编码基因NtSLAH5基因的碱基序列如SEQ IDNO.1所示。

2.如权利要求1所述烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5的编码基因NtSLAH5基因在烟草中的应用，其特征在于，PCR扩增获得NtSLAH5基因时，具体步骤为：

（1）提取烟草样品的总RNA，并反转录为cDNA备用；

（2）设计扩增引物序列如下：

F：5’-CGCGAGCTCGGTACCATGGTTAAAAGTGAATT-3’，

R：5’-GCTCACCATGGATCCTACTATTGATAACCG-3’；

以步骤（1）中所制备cDNA为模板，利用上述引物进行PCR扩增。

3.如权利要求1所述烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5的编码基因NtSLAH5基因在烟草中的应用，其特征在于，沉默NtSLAH5基因时，用于沉默NtSLAH5基因的瞬时沉默VIGS载体的构建方法为：

利用病毒诱导的基因沉默技术，以所述烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5的编码基因NtSLAH5基因的特异性核苷酸片段作为引导序列，将该特异性核酸片段连接到瞬时表达载体TRV上，转化后，进一步经筛选、鉴定，构建获得瞬时沉默VIGS载体：TRV-NtSLAH5；

所述烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5的编码基因NtSLAH5基因的特异性核苷酸片段指SEQ ID NO.1中第1112位-1448位核苷酸；

利用转基因技术，将VIGS载体转化烟草植株后，用于沉默NtSLAH5基因，使得烟草慢阴离子通道蛋白NtSLAH5蛋白表达量明显降低甚至无法表达，最终降低植物体中氯离子含量。