[发明专利]一组打破烟草TMV抗性基因N上游（5’端）连锁累赘的分子标记及其应用

说明书

本发明公开了一组打破烟草TMV抗性基因N上游（5’端）连锁累赘的分子标记及其应用。所述的打破烟草TMV抗性基因N上游（5’端）连锁累赘的分子标记编号为TMn007、TMn025、TMn027、TMn085、TMn113、TMn131、TMn163、TMn183、TMn203、TMn223、TMn226、TMn233、TMn245、TMn249、TMn288、TMn302、TMn306和TMn323_N。本发明所述的一组分子标记具有稳定、可靠、简捷和高灵敏度的特点，可用于检测和判断烟草N基因上游（5’端）不同位置的连锁累赘片段打破信息，培育出既含有N基因又能完全打破或在不同位置部分打破不利连锁累赘影响的烟草抗TMV新品种。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一组打破烟草TMV抗性基因N上游（5’端）连锁累赘的分子标记及其应用。

背景技术

烟草花叶病是由属于花叶病毒家族的烟草花叶病毒（Tobacco Mosaic Virus ,TMV）引起的，因其宿主为包括烟草在内的茄科作物，因其严重影响烟叶的产量和品质，是我国烟叶生产上的重要病害。目前，生产上主要采取药剂防治和人为销毁田间病残体等措施进行防治，虽在控制TMV的发生流行上取得了一定的效果，但在局部田块爆发TMV的情况仍然时有发生，对烟草产业造成巨大经济损失。因此，选育抗病品种、提高烟草本身的抗病性是防治TMV的根本途径。

在采用传统的杂交育种手段获得的含有N基因而具有TMV抗性的烟草品种中，除了目标基因N外还携带N基因上（5’端）下游（3’端）紧密连锁的累赘片段（源自野生烟-心叶烟染色体片段）。因连锁累赘的存在，使烟草在获得TMV抗性的同时也存在产量上较低、上部叶落黄较慢、后期成熟叶片烘烤困难等不利影响，严重阻碍了含有TMV抗性基因N的烟草在生产上大面积推广应用。已有研究证明N基因本身除了提供TMV抗性外，并无产量和产值的不利影响，而连锁累赘造成的不利性状或影响是源自N基因上（5’端）下游（3’端）紧密连锁片段上的其他基因（Lewis RS., Linger LR., Wolff MF., Wernsman EA., The negativeinfluence of N-mediated TMV resistance on yield in tobacco: linkage dragversus pleiotropy. Theor Appl Genet, 2007, 115:169-178; Lewis RS, Rose C,Agronomic performance of tobacco mosaic virus-resistant tobacco lines andhybrids possessing the resistance gene N introgressed on differentchromosomes. Crop Sci., 2010, 50:1339-1347）。