[发明专利]一种排硫硫杆菌的细胞固定化方法在审
| 申请号： | 201811372750.6 | 申请日： | 2018-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN109207467A | 公开（公告）日： | 2019-01-15 |
| 发明（设计）人： | 胡永红;牛志强;杨文革;郝爱香;孔京;李海涛 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N11/10 | 分类号： | C12N11/10;C12R1/01 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛;袁正英 |
| 地址： | 210009 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 排硫硫杆菌 细胞固定化 固定化细胞 固定化效率 固定化载体 聚乙烯亚胺 氯化钙溶液 充分混合 培养菌株 细胞颗粒 硬化处理 固定化 交联剂 菌悬液 卡拉胶 菌体 制备 洗涤 | ||
1.一种排硫硫杆菌的细胞固定化方法，具体包括以下步骤：
(1)将排硫硫杆菌于培养基中在温度28～30℃，转速160～180rpm/min条件下培养48～72h，制备菌体浓度为5～10g/L的菌悬浮液；
(2)在所得菌悬液中加入固定化载体卡拉胶及交联剂，混合均匀后得到混合液；
(3)将步骤(2)中所得到的混合液加入氯化钙溶液中，充分混合后于15～20℃下静置，硬化10～24h，经过滤洗涤后，得到固定化细胞。
2.如权利要求1所述的细胞固定化方法，其特征在于步骤(1)中排硫硫杆菌，拉丁学名为Thiobacillus thioparus，参据的微生物：NJYH5327，保藏中心登记入册编号是CGMCCNo.12756，保藏日期2016年7月11日。
3.如权利要求1所述的细胞固定化方法，其特征在于步骤(1)中培养基成分为：NH4Cl0.4～0.6g/L，MgSO4 0.7～0.9g/L，K2HPO4 4～6g/L，KH2PO4 4～6g/L，Na2S2O3 9～12g/L，pH6.5～7；最终制得的菌悬液中菌体浓度为5～10g/L。
4.如权利要求1所述的细胞固定化方法，其特征在于步骤(2)中所述的交联剂为聚乙烯亚胺，其质量浓度为3～7％；步骤(2)中加入的固定化载体卡拉胶在混合液中的质量百分比为3～5％；交联剂于混合液中的体积比为3～4％。
5.如权利要求1所述的细胞固定化方法，其特征在于步骤(3)中氯化钙溶液的质量百分比浓度为2～7％；混合液与氯化钙溶液按体积比1︰1～3.5加入。
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