[发明专利]一种泌尿生殖道支原体双相培养基

说明书

本发明公开一种泌尿生殖道支原体双相培养基，属于微生物检测领域。本发明培养基包括液体培养基和固体培养基两部分，固体培养基置于容器中，形成一个斜面，同时所述斜面的1/4‑1/2浸没在液体培养基中；培养基成分主要有酵母浸粉、牛心浸粉、大豆蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、硫酸锰、半胱氨酸盐酸盐、尿素、精氨酸、谷氨酰胺、马血清、DMEM液体培养基、丙酮酸钠、酚红指示剂、制霉素、青霉素以及琼脂；所述容器还包括一个可密封所述容器的内部空间的密封部件以及一个滤网，滤网内放置有二氧化碳发生片，在培养过程中可以吸收水汽从而释放二氧化碳，因此不再需要二氧化碳培养箱，整个过程操作简单，特异性高，易于实验室操作。

技术领域

本发明属于微生物检测领域，具体涉及一种泌尿生殖道支原体培养基。

背景技术

支原体，又名霉形体，是目前发现的一类大小介于病毒与细菌之间、无细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌器的最简单的原核生物之一。目前已发现的寄居于人体的支原体至少16种，其中7种为条件致病菌，而又以这7种中的人型支原体(Mh)和解脲支原体(Uu)最为常见，能在约70％的性活跃人群的泌尿生殖系统中检测到。泌尿生殖道支原体作为导致非淋菌性尿道炎及宫颈炎的第二大致病菌，约有20-30％的非淋菌性尿道炎是由Mh及Uu感染引起。该细菌感染甚至还可以引起宫颈炎、产后感染、自发性流产乃至不孕不育等严重后果。故快速准确地诊断泌尿生殖道支原体感染，并对其进行针对性抗感染治疗有很高实用价值和临床意义

常规的支原体诊断方法如下：

(1)分子生物学方法：核酸杂交、PCR、LCR等方法，快速、敏感、特异性高，但是，对操作要求较高，成本高，且易出现污染；

(2)液体培养法；

(3)固体培养法。

Uu和Mh主要通过体外培养进行检测，在临床应用比较广泛。生殖支原体营养要求高,在一般支原体培养基不生长。由于培养难度大，临床主要通过聚合酶链反应(PCR)技术来检测生殖支原体。支原体培养是目前国内医疗机构进行Uu和Mh检测的重要手段，主要是使用液体培养基直接检测并同时进行支原体药敏试验，以达到尽早为临床治疗用药提供依据的目的。但液体培养法有时候会受到细菌或真菌的污染导致假阳性，给临床带来误诊。固体培养是经24-48h小时后用显微镜直接观察培养基上支原体属典型的菌落形态，是诊断支原体感染的“金标准”。但固体培养法报告检测时间太长，不利于临床的快速诊断。因此，本领域目前亟需检测特异性高同时又能够达到快速检测目的的泌尿生殖道支原体检测方法。

发明内容

为解决目前泌尿生殖道检测中，液体培养法存在假阳性，而采用固体培养基检测又太耗费时间的缺陷，且需要专业的设备二氧化碳培养箱和显微镜观察，整个检测过程费时费力且准确度不高的问题。本发明为解决这一问题，针对泌尿生殖道支原体提供一种固液双相培养基，该培养基检测过程不需要另外配制二氧化碳培养箱，简化检测流程，提高检测效率，同时对泌尿生殖道支原体具备针对性，培养效果好，有利于临床的快速诊断，提高检测特异性。本发明所采用的技术方案是：

一种泌尿生殖道支原体双相培养基，包括液体培养基和固体培养基两部分，固体培养基置于容器中，形成一个斜面，同时所述斜面的1/4-1/2浸没在液体培养基中；所述容器还包括一个可密封所述容器的内部空间的密封部件；其中液体培养基的成分包括：2～10g/L酵母浸粉、2～10g/L牛心浸粉、2～10g/L大豆蛋白胨、1～10g/L氯化钠、1～10g/L磷酸氢二钾、0.05～1.5g/L硫酸锰、0.01～8g/L半胱氨酸盐酸盐、0.5～8g/L尿素、0.5～8g/L精氨酸、0.1～4.0g/L谷氨酰胺、300～500mL/L马血清、5～50mL/L DMEM液体培养基、0.05～15g/L丙酮酸钠、1～10mL/L质量体积百分数为0.1～0.5％酚红指示剂、0.001～0.050g/L制霉素和300～8000IU/L青霉素；固体培养基的成分除包括10～30g/L琼脂外，其余组分与所述的液体培养基的组分相同。