[发明专利]一种ABO血型突变检测位点

说明书

本发明的目的是提供一种用于检测ABO血型系统A型变异型引发的急性溶血性输血反应的新突变位点，为新的A型变异型基因编码区域由起始密码子起第467和第798位碱基。本发明提供了A型变异型基因的新的用途，从而提供了一种有效的对能够引发的急性血管内溶血性输血反应的快速基因诊断、基因筛查及遗传咨询的途径，应用效果表明本发明所提供的基因的新突变位点及检测引物可以有效的用于临床患者外周血进行新的A型变异型基因突变位点的快速检测。

技术领域

本发明属于基因诊断制品技术领域，具体涉及一种新发现的可引发急性或迟发性溶血性输血反应ABO血型A变异型的新突变位点。

背景技术

ABO血型系统主要是根据人类红细胞表面所含不同的凝集原，即血型抗原而命名的。根据凝集原A、B的分布把血液分为A、B、AB、O四型。目前采供血机构主要采用血清学方法对献血者血液标本进行正反定型,然而在大量的献血人群标本中常发现一些ABO变异型(ABO亚型)。例如本发明中发现的这例A变异型，红细胞上A抗原强度较正常红细胞减弱，血浆中存在抗-A1抗体，一旦输注A型人血液，极易发生输血性溶血反应。

溶血性输血反应(Hemolytic Transfusion Reaction；HTR)是受血者输入不相容红细胞或存在同种抗体的供者血浆，使供者红细胞或自身红细胞在体内发生破坏而引起的反应。溶血性输血反应按发生的缓急分为急性溶血性输血反应(AHTR)和迟发性溶血性输血反应(DHTR)。急性溶血性输血反应通常由ABO血型系统不相容输血引起，在输血中或输血后数分钟至数小时内发生的血管内溶血，具有致死性危险，通常输入10～15ml血后即可发生。溶血性输血反应的发生，会影响患者的病情和输血疗效，严重时还可能导致患者死亡。因此，如何选择适当的血液输注，保证输血安全有效，至关重要。

溶血性输血反应主要由ABO血型的错误输注引起，据美国FDA报道，2009～2013年ABO血型不合引起的溶血性输血反应占输血相关死亡率为7％。ABO血型变异型(亚型)不合也会引起输血反应，部分A2亚型患者血清中有抗-A1抗体，2018年荷兰报道了一例A2亚型患者输入A1型红细胞引起严重的溶血性输血反应死亡的事件，因此应引起重视。在对A2亚型的筛查中，首次发现了一例新的A变异型，并针对此种新的A型变异型的新突变位点来建立快速检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种ABO血型突变检测位点，即一种ABO血型系统A型变异型血型基因引发的急性溶血性输血反应的SNP位点，从而弥补现有技术的不足。

申请人对一个A型变异型血型基因的患者进行了测序，找到了该患者A型变异型基因存在遗传上的致病突变，造成了A抗原数量和功能的改变，并且通过免疫刺激产生抗-A1抗体，一旦发生错误血型的输注(输注A型血)，很有可能发生致命的危害。为了避免其通过输血造成急性溶血性输血反应，从而促成了本项发明。

本发明提供一种用于检测ABO血型系统A型变异型血型基因引发的急性溶血性输血反应的新突变位点，为ABO血型基因编码区域由起始密码子起第467和798位碱基；其中第467位碱基发生了CT杂合突变，第798位碱基插入T碱基发生了移码突变。

其中用于检测上述新突变位点的直接扩增及测序引物信息如下：

ABO-E7F:5'-GTGGACGTGGACATGGAGT-3'SEQ ID NO:1

ABO-E7R:5'-GCAGTGAACCTCAGCTTCCTCA-3'SEQ ID NO:2

用于检测上述新突变位点单倍型扩增及测序引物信息如下：

ABO-E6mo：5'-CGGGATCCATGTGGGTGGCACCCTGCCA-3'SEQ ID NO:3

ABO-E7mo：5'-GGGCCTAGGCTTCAGTTACTC-3'SEQ ID NO:4