[发明专利]贝莱斯芽孢杆菌、应用及抑制制剂的制备方法有效
申请号: | 201811371200.2 | 申请日: | 2018-11-18 |
公开(公告)号: | CN109762754B | 公开(公告)日: | 2021-07-09 |
发明(设计)人: | 唐前君;刘天波;陈武;刘放;董鹏;刘双清;周志成;蔡海林;曾维爱 | 申请(专利权)人: | 湖南农业大学;中国烟草中南农业试验站 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/22;A01P1/00;C05G3/00;C12R1/07 |
代理公司: | 安化县梅山专利事务所 43005 | 代理人: | 夏赞希 |
地址: | 410128 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 贝莱斯 芽孢 杆菌 应用 抑制 制剂 制备 方法 | ||
本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌、应用及抑制制剂的制备方法,所述贝莱斯芽孢杆菌为抑制烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒的菌株,所述贝莱斯芽孢杆菌已在中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCC NO:M2018004。通过本发明提供的所述贝莱斯芽孢杆菌,能有效抑制TMV和PVY,进而达到防治TMV和PVY的作用。
技术领域
本发明属于生物防治技术领域,尤其涉及一种贝莱斯芽孢杆菌、应用及抑制制剂的制备方法。
背景技术
我国烟区辽阔,自然条件迥异,烟草本身可塑性强,容易受环境影响而变异,经过人们长期的栽培和选择,形成了各具特色的众多品种,加之不断地从国外引进新品种,形成了类型俱全、数量丰富的烟草资源。虫害和病害是影响烟草农艺性状和经济性状的威胁因子,如烟草普通花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY),TMV和PVY是目前为止在烟草生产上分布最广且发生普遍的两大类病害。烟草感染TMV和PVY后,叶绿素被破坏,光合作用减弱,叶片生长受抑制,防治较为困难,减产幅度为20%-80%,全球每年因这两种病害造成的损失可达1亿多美元。传统的化学防治方法对抗TMV和PVY的效果不佳,并且连年使用化学药剂,对环境造成巨大污染。
因此,有必要提供一种生物防治TMV和PVY病菌的方法。
申请内容
本发明所要解决的技术问题是,克服以上背景技术中提到的不足和缺陷,提供一种贝莱斯芽孢杆菌、应用及抑制制剂的制备方法,以解决现有TMV和PVY采用化学药剂防治,致使污染环境的技术问题。
为解决上述技术问题,本发明提出的技术方案为:提供一种贝莱斯芽孢杆菌,所述贝莱斯芽孢杆菌为抑制烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒的菌株,所述贝莱斯芽孢杆菌已在中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCC NO:M2018004。
优选地,所述贝莱斯芽孢杆菌的16s rDNA如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供了一种如前述的贝莱斯芽孢杆菌在防治烟草花叶病毒和/或马铃薯Y病毒上的应用。
优选地,制成含有所述贝莱斯芽孢杆菌的生物制剂、生物土壤或生物肥料,以防治烟草花叶病毒和/或马铃薯Y病毒。
本发明还提供了一种抑制制剂的制备方法,其特征在于,所述抑制制剂用于抑制烟草花叶病毒,该制备方法包括::
步骤一,挑取如权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌的单菌落于15~30ml LB液体培养基,在温度为29~31℃下,160~200r/min振荡培养,直至OD600在0.6~0.8,制备得到种子液;
步骤二,将所述步骤一中的种子液接种于LB液体培养基中进行发酵,所述种子液在所述LB液体培养基的浓度为4~5%,在温度为29~31℃下,160~200r/min恒温培养50h~75h,制备得到所述抑制制剂。
本发明还提供了一种抑制制剂的制备方法,其特征在于,所述抑制制剂用于抑制马铃薯Y病毒,该制备方法包括::
步骤一,挑取如权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌的单菌落于15~30ml LB液体培养基,在温度为29~31℃下,160~200r/min振荡培养,直至OD600在0.6~0.8,制备得到种子液;
步骤二,将所述步骤一中的种子液接种于装有LB液体培养基中进行发酵,所述种子液在所述LB液体培养基的浓度为4~5%,在温度为29~31℃下,160~200r/min恒温培养50h~75h,制备得到所述抑制制剂。
与现有技术相比,本发明的优点在于:本发明提供的所述贝莱斯芽孢杆菌能有效抑制TMV和PVY的生长,并在一定时间段内,持续具有显著的抑制作用,可用于TMV和PVY引起的烟草花叶病。
附图说明
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