[发明专利]一种细锥香茶菜药材中细锥香茶菜乙素的含量测定方法

说明书

本发明公开了一种细锥香茶菜药材中细锥香茶菜乙素的含量测定方法，所述细锥香茶菜乙素的含量测定方法为：色谱条件：Thermo Accucore C18(4.6mm×150mm，2.0μm)；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为0.1％磷酸，等度洗脱；检测波长：210‑280nm；柱温：20‑30℃；流速：0.8‑1.2mL·min^‑1；进样量：10μL；对照品溶液的制备；供试品溶液的制备；HPLC法测定。本发明以细锥香茶菜乙素为测定指标，采用高效液相色谱法，建立细锥香茶菜药材的含量测定方法，为细锥香茶菜药材的质量控制及评价研究提供实验依据；所述测定方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，为细锥香茶菜药材的深度开发利用和相关制剂的安全有效和质量可控提供依据。

技术领域

本发明涉及一种细锥香茶菜药材中细锥香茶菜乙素的含量测定方法，属于药品技术的领域。

背景技术

细锥香茶菜Isodon coetsa(Buch.-Ham.ex D.Don)Hara，唇形科香茶菜属植物，分布于我国西南的贵州、云南、西藏、四川和广西等省份。因其治疗肝炎、萎缩性胃炎及各种肿瘤效果良好，在民间得到了广泛的应用。通过文献查阅分析，有关细锥香茶菜的质量控制方面报道较少，目前仅有对其中总黄酮及挥发油成分的含量进行过报道，其主要活性二萜成分含量测定方面研究尚属空白。本实验首先通过柱色谱、制备液相等各种分离手段对细锥香茶菜中主要活性二萜成分进行分离纯化，经核磁数据比对，分离纯化得到了一个含量较大的二萜化合物细锥香茶菜乙素。据文献查阅可知，细锥香茶菜乙素为细锥香茶菜药材的主要活性成分，具有显著的抗肿瘤、抗癌及治疗白血病等药理作用。因目前未见关于细锥香茶菜药材中细锥香茶菜乙素含量测定方法的研究报道，不利于对细锥香茶菜的进一步开发利用。另外，没有对其药效成分进行定量检测，难以控制药材及其相关制剂的质量，无法保证临床用药的安全性和有效性。

发明内容

本发明目的在于，提供一种细锥香茶菜药材中细锥香茶菜乙素的含量测定方法。本发明以细锥香茶菜乙素为测定指标，采用高效液相色谱法，建立细锥香茶菜药材的含量测定方法，为细锥香茶菜药材的质量控制及评价研究提供实验依据；所述测定方法准确，灵敏度高，重复性好，结果可靠，为细锥香茶菜药材的深度开发利用和相关制剂的安全有效和质量可控提供依据。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案实现：一种细锥香茶菜药材中细锥香茶菜乙素的含量测定方法，所述细锥香茶菜乙素的含量测定方法为：

色谱条件：Thermo Accucore C₁₈，4.6mm×150mm，2.0μm；流动相A为甲醇，流动相B为0.1％磷酸水溶液，等度洗脱；检测波长：210-280nm；柱温：20-30℃；流速：0.8-1.2mL·min^-1；进样量：10μL；

对照品溶液的制备：精密称取细锥香茶菜乙素对照品，置容量瓶中，加90-100％甲醇溶液配成0.3000-0.6000mg·mL^-1的对照品溶液；

供试品溶液的制备：取细锥香茶菜药材粉末1.8-2.2g，精密称定，置三角锥形瓶中，精密加入30～90％乙醇溶液15～25mL，称定重量，回流提取，取出，放冷，加30～90％乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，通过0.45μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液；

HPLC法测定：分别吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，测得峰面积值并计算含量，即可。

前述的细锥香茶菜药材中细锥香茶菜乙素的含量测定方法中，等度洗脱程序为：0～20min，70％A。

前述的细锥香茶菜药材中细锥香茶菜乙素的含量测定方法中，所述的回流提取是：在水浴温度80℃下回流提取2h。

前述的细锥香茶菜药材中细锥香茶菜乙素的含量测定方法中，所述检测波长：234nm；柱温：25℃；流速：1mL·min^-1。