[发明专利]一种唾液、口腔拭子基因组DNA保护液在审

专利信息
申请号: 201811362549.X 申请日: 2018-11-15
公开(公告)号: CN109517818A 公开(公告)日: 2019-03-26
发明(设计)人: 辛文斌;孙子奎;丁方美;王锋 申请(专利权)人: 上海派森诺生物科技股份有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/6806
代理公司: 上海天翔知识产权代理有限公司 31224 代理人: 吕伴
地址: 200030 上海市*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 唾液 拭子 口腔 蛋白酶K 保存 基因组DNA 保存液 保护液 细菌 三羟甲基氨基甲烷 十二烷基硫酸钠 表面活性剂 细胞渗透压 成分抑制 口腔细胞 游离DNA 浓度计 降解 可用 制备 蛋白 信封 卫生
【说明书】:

发明公开了一种唾液、口腔拭子基因组DNA保护液,其特征在于,其特征在于,按1升的浓度计,包括如下组分:SDS(十二烷基硫酸钠)0.10~0.2%;NaCL 0.90%;Tris(三羟甲基氨基甲烷)5~15mM;EDTA 20~25mM;蛋白酶K 150‑160mg。该唾液、口腔拭子保存液以SDS、Tris‑HCl、EDTA、NaCl和蛋白酶K为主要成分,可用于唾液保存。NaCl可以维持细胞渗透压,SDS表面活性剂在蛋白酶K作用下可以破坏蛋白成分抑制细菌的滋生,容易引起DNA的降解;Tris‑HCl、EDTA可以保护游离DNA。本发明的DNA保存液是一种针对口腔拭子保存的保存液,其可以较好的保存口腔细胞;其更加卫生,不易滋生细菌;且保存时间长比信封长3‑5倍;制备方法简单,具有较好的社会价值。

技术领域

本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种唾液、口腔拭子基因组DNA保护液。

背景技术

人体组织及体液中提取得到的核酸DNA样本在法医鉴定、疾病检测与治疗等领域应用广泛。当前科研人员和临床医生主要用抗凝血提取DNA,然而抗凝血保存时间稍长后出现凝集现象对提取过程造成不便。同时,通过采血提取DNA还有如下几点不便:(1)对采血人员要求有专业的培训;(2)耗费人力,需要有人辅助完成;(3)部分人心理对抽血无法接受,甚至出现晕血等状况;(4)通量低,无法大量随时随地采集样本。

近些年来,科研和医药领域逐渐采用唾液、口腔拭子取样的方式获取个体的DNA,因为唾液里有一些口腔上皮细胞和唾液腺来源的白细胞,这些细胞里面有DNA。唾液、口腔拭子样本采集相对于传统血液样本采集来讲,是一种对人体无伤害、无痛苦的获取基因组DNA的方法,不易引起被采集者的不适和畏惧心理,该法不会对被采样者造成任何不适,且易接受,因而能最大限度的扩大基因研究的取样范围,特别适合分子流行病学大规模调查,唾液、口腔拭子基因子DNA样品的采集主要为唾液或者口腔黏膜上皮细胞。唾液、口腔拭子样品中含有大量人体分泌的体液,其中包含粘蛋白、球蛋白、消化酶和白蛋白等物质,多种有机物的存在容易滋生大量的微生物,保存需低温且保存时间短,如何避免微生物的生长同时保证脱落细胞中基因组DNA的完整,成为唾液保存液的关键作用所在。

发明内容

为了克服现有技术存在的上述缺陷,本发明的目的在于提供一种唾液、口腔拭子基因组DNA保护液。

为了实现本发明的目的,所采用的技术方案是:

一种唾液、口腔拭子基因组DNA保护液,按1升的浓度计,包括如下组分:

SDS(十二烷基硫酸钠)0.10~0.2%;

NaCL 0.90%;

Tris(三羟甲基氨基甲烷)5~15mM;

EDTA 20~25mM;

蛋白酶K 150-160mg。

在本发明的一个优选实施例中,所述SDS(十二烷基硫酸钠)浓度为0.10。

在本发明的一个优选实施例中,所述Tris(三羟甲基氨基甲烷)浓度为15mM。

在本发明的一个优选实施例中,所述EDTA浓度为20mM。

在本发明的一个优选实施例中,所述蛋白酶K浓度为150mg。

本发明的有益效果在于:

该唾液、口腔拭子保存液以SDS、Tris-HCl、EDTA、NaCl和蛋白酶K为主要成分,可用于唾液保存。

NaCl可以维持细胞渗透压,SDS表面活性剂在蛋白酶K作用下可以破坏蛋白成分抑制细菌的滋生,容易引起DNA的降解;Tris-HCl、EDTA可以保护游离DNA。

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