[发明专利]一种从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法在审
| 申请号: | 201811360957.1 | 申请日: | 2018-11-15 |
| 公开(公告)号: | CN109294959A | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
| 发明(设计)人: | 王志林;朱翠;蒋宗勇;陈庄;贝锦龙;俞婷;王蕾 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院农业生物基因研究中心 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/02;C12R1/10;C12R1/125 |
| 代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 崔红丽 |
| 地址: | 510640 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 发酵液 芽孢杆菌 芽孢杆菌细胞 絮凝剂 回收 后处理 细菌 发酵液浓缩 传统喷雾 发酵液pH 干燥工艺 减少设备 上层清液 细胞结合 沉积液 促凝剂 蒸发量 沉降 富含 后移 菌体 絮凝 絮团 回收率 沉积 下层 微生物 无毒 浓缩 安全 投资 | ||
1.一种从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于是通过往芽孢杆菌发酵液添加絮凝剂和促凝剂使细胞快速絮凝成团沉积;
包括如下步骤:
首先用酸性溶液调节芽孢杆菌发酵液pH值至5.0~7.0,再往调整好pH值的芽孢杆菌发酵液中加入20ml/L~60ml/L壳聚糖溶液,采用较快速度搅拌2~3min,搅拌转速120~150rpm,使壳聚糖与发酵液充分混合均匀,之后加入10ml/L~40ml/L海藻酸钠溶液,缓慢搅拌,使菌体与壳聚糖絮凝成团,静置沉降包含菌体的絮团,收集底层富含芽孢杆菌菌体浓缩液。
2.根据权利要求1所述的从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于:所述的壳聚糖溶液的浓度为1%~2%。
3.根据权利要求1所述的从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于:所述的海藻酸钠溶液的浓度为0.5%~2.0%。
4.根据权利要求1所述的从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于:用酸性溶液调节芽孢杆菌发酵液pH值至6.0~7.0。
5.根据权利要求1所述的从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于:所述的芽孢杆菌包括枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、侧孢芽孢杆菌(Bacilluslaterosporus)。
6.根据权利要求1所述的从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于:所述的壳聚糖添溶液的添加量为40ml/L,所述的海藻酸钠溶液的添加量为20ml/L。
7.根据权利要求1所述的从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于:
所述的壳聚糖溶液和海藻酸钠溶液添加顺序为先添加壳聚糖溶液与发酵液充分搅拌混合均匀生成絮状小颗粒,之后再加入海藻酸钠溶液缓慢搅拌形成块状絮团,搅拌转速以50~60rpm为宜。
8.根据权利要求1或7所述的从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于:所述的缓慢搅拌的时间为2~5min。
9.根据权利要求1所述的从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于:所述的静置的时间为15~30min。
10.根据权利要求1所述的从芽孢杆菌发酵液中快速回收芽孢杆菌细胞的方法,其特征在于:
所述的收集底层富含芽孢杆菌菌体浓缩液,是待包裹细菌的絮团沉降后,直接从上层移去清液,回收下层的菌体溶液,作进一步处理;或者从底层放出菌体悬浊液,将悬浊液再静置沉淀10~30min后吸走上层清液,收集下层沉积菌体。
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