[发明专利]检测沙门菌的引物组和试剂盒有效
申请号: | 201811347780.1 | 申请日: | 2018-11-13 |
公开(公告)号: | CN110184363B | 公开(公告)日: | 2020-07-24 |
发明(设计)人: | 扈庆华;左乐;姜伊祥;江敏;石晓路;林一曼;邱亚群;李迎慧 | 申请(专利权)人: | 深圳市疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/10;C12N15/10 |
代理公司: | 深圳中一联合知识产权代理有限公司 44414 | 代理人: | 方良 |
地址: | 518000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 沙门 引物 试剂盒 | ||
1.一种检测沙门菌的引物组,其特征在于,所述引物组基于荧光探针熔解曲线法设计,所述引物组检测所述沙门菌的抗原基因进行血清型分子鉴定,所述引物组包括:
针对A群抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2;
针对B群抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4;
针对C1群抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6;
针对C2-C3群抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8;
针对D群抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10;
针对E群抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12;
针对a抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14;
针对b抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16;
针对c抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18;
针对d抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20;
针对e,n,x/e,n,z15抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22;
针对i抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24;
针对v抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26;
针对g,m抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28;
针对z4,z23抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30;
针对e,h抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32;
针对f,g抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34;
针对f,g,s/g,s,t抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36;
针对r抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38;
针对1,2抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40;
针对1,5抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42;
针对1,6抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:44;
针对1,7抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46;
针对z6抗原基因的杂交连接引物SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48。
2.一种检测沙门菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的引物组。
3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括连接酶和连接酶缓冲液,所述连接酶、连接酶缓冲液与所述引物组用于杂交连接反应体系。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于:所述杂交连接反应系统的条件:95℃预变性5min,60℃连接80min,95℃变性5min。
5.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括荧光探针、PCR缓冲液、MgCl2、dNTP和rTaq酶,所述荧光探针、PCR缓冲液、MgCl2、dNTP和rTaq酶用于荧光探针溶解曲线检测体系。
6.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述荧光探针包括ROX探针、FAM探针和Cy5探针。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述ROX探针的序列如SEQ ID NO:49所示;或者,
所述FAM探针的序列如SEQ ID NO:50所示;或者,
所述Cy5探针的序列如SEQ ID NO:51所示。
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