[发明专利]一种快速评价葡萄糖氧化酶产酸能力的方法

说明书

本申请公开了一种快速评价葡萄糖氧化酶产酸能力的方法，所述方法包括如下步骤：(1)配置一定浓度的葡萄糖溶液，静置一段时间后得到pH稳定的葡萄糖溶液，测定pH稳定的葡萄糖溶液的pH，得第一pH值；(2)向步骤(1)pH稳定的葡萄糖溶液中加入一定量的待测葡萄糖氧化酶，反应一段时间后，测定溶液的pH，得第二pH值；(3)比较第一pH值和第二pH值，即可以反映待测葡萄糖氧化酶的产酸能力。本发明具有检测时间短，方法简单，快速，重现性好的优点。

技术领域

本发明涉及一种快速评价葡萄糖氧化酶产酸能力的方法。

背景技术

葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase，简称GOD)能够在有氧气的条件下专一性催化β-D-葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢。葡萄糖酸可以降低动物肠道pH值，再加上氧气被消耗，可以抑制动物肠道内有害菌生长繁殖、促进有益菌的生长繁殖。葡萄糖氧化酶广泛地分布于动物、植物和微生物体内，但由于微生物具有生长繁殖速度快，来源广等特点，使之成为葡萄糖氧化酶的主要来源，微生物中的主要生产菌株为黑曲霉和青霉。葡萄糖氧化酶广泛应用于食品、饲料、医药等行业中，起到了去除葡萄糖、脱氧、杀菌等作用。

葡萄糖氧化酶在饲料领域作为一种新型酶制剂，有着出色的产酸能力，能在底物存在的条件下快速降低溶液的pH，而低pH具有改善动物肠道健康的作用。

当前要解决葡萄糖氧化酶产酸能力的评价问题，迫切需要一种体外评判方法，来真实快速地反映葡萄糖氧化酶在实际生产中的产酸能力。

发明内容

针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种快速评价葡萄糖氧化酶产酸能力的方法，具有检测时间短，方法简单，快速，重现性好的优点。

为达到以上目的，本发明采取的技术方案是：

一种快速评价葡萄糖氧化酶产酸能力的方法，所述方法包括如下步骤：

(1)配置一定浓度的葡萄糖溶液，静置一段时间后得到pH稳定的葡萄糖溶液，测定pH稳定的葡萄糖溶液的pH，得第一pH值；

(2)向步骤(1)pH稳定的葡萄糖溶液中加入一定量的待测葡萄糖氧化酶，反应一段时间后，测定溶液的pH，得第二pH值；

(3)比较第一pH值和第二pH值，即可以反映待测葡萄糖氧化酶的产酸能力。

在上述方法中，所述步骤(1)中葡萄糖溶液的浓度为1％—30％，优选5％—10％，更优选6％；所述步骤(1)中静置一段时间为0.5—25min。

在上述方法中，所述步骤(2)中加入的待测葡萄糖氧化酶的终浓度为0.1—10U/mL，优选0.3—1U/mL；所述步骤(2)反应一段时间为1—10h，优选，2-8h，更优选2h。

在上述方法中，所述步骤(1)中在配置葡萄糖溶液时加入一定浓度的强酸强碱盐；

优选的，所述强酸强碱盐选自KCl、NaCl、K₂SO₄、Na₂SO₄、KNO₃、或NaNO₃，优选KCl或NaCl，更优选KCl。

在上述方法中，当所述强酸强碱盐为KCl时，所述强酸强碱盐的终浓度为8.4×10^-4mol/L—2.7×10^-2mol/L(即实施例5表5中10％KCl溶液加入量为0.03125—1mL)，优选6.7×10^-3mol/L—1.3×10^-2mol/L(即实施例5表5中10％KCl溶液加入量为0.25—0.5mL)；