[发明专利]一种临床级别无血清细胞冻存液在审
申请号: | 201811340103.7 | 申请日: | 2018-11-12 |
公开(公告)号: | CN109122670A | 公开(公告)日: | 2019-01-04 |
发明(设计)人: | 李海峰;张莹莹 | 申请(专利权)人: | 王晓柯 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100094 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 细胞冻存液 无血清 冷冻保护剂 保存 冰晶 哺乳动物细胞 间充质干细胞 无机盐 长期保存 单核细胞 临床应用 免疫细胞 双重保护 冻存液 细胞库 细胞株 氨基酸 可用 外源 蛋白 损伤 复苏 引入 科研 应用 安全 | ||
本发明公开了一种无血清细胞冻存液,由氨基酸组分、无机盐组分、细胞外冷冻保护剂、细胞内冷冻保护剂等组成。本发明的细胞冻存液,含有双重保护成份,从细胞内和细胞外同时保护细胞免受冻存时冰晶的损伤,大大提高了细胞的复苏率,适应广泛的细胞系保存(可用于细胞长期的保存,可应用于细胞库的建立,科研细胞株保存,临床间充质干细胞、单核细胞、免疫细胞以及所涉及到的所有哺乳动物细胞的长期保存),同时本发明的细胞冻存液中为完全无血清、无蛋白、无DMSO冻存液,避免了临床应用中引入的异种外源成份,更加安全。
技术领域
本发明涉及一种临床级别无血清细胞冻存液。
背景技术
细胞冻存液在保存细胞时,通过冷冻保护剂在冻存过程对细胞进行保护,传统的细胞保护剂仅为细胞内保护剂,细胞受冻存时容易受到冰晶的损伤,细胞复苏率低,无法有效保护细胞。另外,现有技术中的细胞冻存液通常含有动物源性物质,成分复杂,在临床应用上存在潜在的风险,也增加了污染的几率,同时目前大多数冻存液都含有DMSO(二甲基亚砜),临床应用存在一定的毒性。
发明内容
针对上述现有技术,本发明提供了一种临床级别无血清细胞冻存液,可用于细胞长期的保存,可应用于细胞库的建立,科研细胞株保存,临床间充质干细胞、单核细胞、免疫细胞以及所涉及到的所有哺乳动物细胞的长期保存,同时冻存液中不含DMSO成分,以及动物源成分,更安全,符合临床需要。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种临床级无血清细胞冻存液,是由以下浓度的组分组成的,各浓度单位若无特别说明,均为mg/L:
L-精氨酸 100~300;
CuSO4·5H2O 0.0005~0.005;
L-天门冬酰胺25~75;
L-天门冬氨酸10~30;
L-谷氨酸 10~30;
Ni(NO3)2· 6H2O 0.00002~0.0002;
L-谷氨酰胺 0~500;
ZnSO4· 7H2O 0.06~0.6;
甘氨酸 5~15;
CoCl2· 6H2O 0.001~0.008;
L-组氨酸10~30;
NaSiO3· 9H2O 0.001~0.01;
L-异亮氨酸 25~75;
Na3VO4· 12H2O 0.0005~0.005;
L-赖氨酸盐酸20~60;
SnC12· 2H2O 0.00001~0.0001;
L-蛋氨酸10~30;
Na2SeO3 0.002~0.01;
L-苯丙氨酸10~30;
FeSO4· 7H2O 0.2~1.6;
L-脯氨酸10~30;
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