[发明专利]一种乳腺癌组织的转移及冻存方法

说明书

本发明属于活体组织转移技术领域，具体涉及一种乳腺癌组织的转移及冻存方法。针对乳腺癌组织在两地间转运时，常因保存不善的问题而影响了活组织标本的活性，本发明的技术方案是，包括如下步骤：[1]在冰上保存冷冻培养基，所述冷冻培养基为质量分数100％的胎牛血清；[2]将新鲜的乳腺癌组织在4℃的磷酸缓冲盐溶液中漂洗；[3]将经过步骤[2]漂洗的乳腺癌组织切成薄片，得到肿瘤组织片；[4]将步骤[3]得到的肿瘤组织片放入步骤[1]准备的冷冻培养基中，并进行转运。本发明还提供一种技术方案类似的乳腺癌细胞冻存方法。

技术领域

本发明属于活体组织转移技术领域，具体涉及一种乳腺癌组织的转移及冻存方法。

背景技术

在生物实验研究中，常常涉及组织移植的操作，例如可以将乳腺癌组织移植到实验小鼠体内进行培养。乳腺癌活组织移植过程中组织标本的活性是一个影响移植成功率的重要因素之一。肿瘤组织一旦被从人体切割下来后，其内的细胞很快就会因为缺乏水，电解质，氧气等因素而死亡。

现有技术中，乳腺癌活组织切下时地点在医院，而进行移植实验的地点在实验室，乳腺癌组织在两个地点之间转运时，常因保存不善的问题而影响了活组织标本的活性。

发明内容

针对乳腺癌组织在两地间转运时，常因保存不善的问题而影响了活组织标本的活性，本发明提供一种乳腺癌组织的转移及冻存方法，其目的在于：在转运过程中维持乳腺癌组织的活性，避免由于活性丧失而影响后续的实验研究。

本发明采用的技术方案如下：

一种乳腺癌组织的转移方法，包括如下步骤：

[1]在冰上保存冷冻培养基，所述冷冻培养基为质量分数100％的胎牛血清；

[2]将新鲜的乳腺癌组织在4℃的磷酸缓冲盐溶液中漂洗；

[3]将经过步骤[2]漂洗的乳腺癌组织切成薄片，得到肿瘤组织片；

[4]将步骤[3]得到的肿瘤组织片放入步骤[1]准备的冷冻培养基中，并进行转运。

采用该技术方案后，利用胎牛血清提供近似体内的细胞外液的环境与营养成分。并且由于将乳腺癌组织切成薄片，可以减少组织内部细胞的缺血缺氧，有利于保持组织的湿润，防止脱水。其次，通过低温处理使得乳腺癌组织内的细胞代谢水平降低。综合上述效果，能够在转运期间最大程度地保持活组织标本的活性。

优选的，步骤[2]的漂洗过程进行两次。

优选的，肿瘤组织片为长2.5-3.5mm，宽1.8-2.2mm和厚度0.8-1.2mm的薄片。

优选的，步骤[4]中，冷冻培养基的体积至少为肿瘤组织片的十倍。

优选的，肿瘤组织片经过步骤[4]转运后，在使用前用磷酸缓冲盐溶液漂洗。

一种乳腺癌组织的冻存方法，其特征在于，包括如下步骤：

[1]在冰上用冻存管保存冷冻培养基，所述冷冻培养基为质量分数10％的二甲基亚砜和90％的胎牛血清；

[2]将新鲜的乳腺癌组织在4℃的磷酸缓冲盐溶液中漂洗；

[3]将经过步骤[2]漂洗的乳腺癌组织切成薄片，得到肿瘤组织片；

[4]将步骤[3]得到的肿瘤组织片放入步骤[1]准备的冷冻培养基中，并进行长期冻存。

采用该技术方案后，利用胎牛血清提供近似体内的细胞外液的环境与营养成分。并且由于将乳腺癌组织切成薄片，可以减少组织内部细胞的缺血缺氧，有利于保持组织的湿润，防止脱水。其次，通过低温处理使得乳腺癌组织内的细胞代谢水平降低。综合上述效果，能够在冻存期间最大程度地保持活组织标本的活性。