[发明专利]一种基于特征成分气相色谱-质谱指纹图谱鉴别栀子油的方法

权利要求书

1.一种基于特征成分气相色谱-质谱指纹图谱鉴别栀子油的方法，其特征在于，从栀子油的挥发性成分着手，使用顶空固相微萃取、结合气相色谱-质谱联用技术，分析检测栀子及栀子油的挥发性特征成分，建立栀子及栀子油的挥发性成分的气相色谱-质谱特征指纹图谱，通过评价软件对特征指纹图谱的有效峰进行比对，从而实现对栀子油的鉴别；

包括如下步骤：

步骤（1）栀子和正宗栀子油挥发性成分的气相色谱-质谱分析：将栀子经70℃恒温干燥后粉碎机粉碎，取1g的栀子粉或1mL的栀子油置于20mL顶空进样瓶中，迅速密封，插入50/30μm DVB/CAR/PDMS萃取纤维，在60℃吸附挥发性成分40min后，将萃取纤维拔出并迅速插入气相色谱仪进样口解吸5 min，采用气相色谱-质谱联用仪，对挥发性成分进行分离和定性分析，对总离子流图中的各峰经质谱计算机数据系统检索及核对NIST14 LIBRARY标准质谱图，匹配度大于85%的化合物作为鉴定结果，获得栀子和正宗栀子油挥发性成分的气相色谱-质谱谱图；

步骤（2）栀子油挥发性成分气相色谱-质谱的特征指纹图谱的建立：根据步骤（1）栀子和正宗栀子油挥发性成分的气相色谱-质谱分析结果，选取11个栀子和栀子油的共同特征峰:(1) 出峰时间 5.631分钟，己醛，质荷比56.05和72.10；（2）出峰时间8.506分钟，环辛四烯，质荷比51.05、78.05和104.10；（3）出峰时间12.290分钟，2-正戊基呋喃，质荷比53.05、81.05和138.15；（4）出峰时间13.506分钟，2,2,5,5-四甲基-3-环戊烯-1-酮，质荷比70.05、95.10和110.15；（5）出峰时间14.071分钟，1,2,3-三甲基苯，质荷比104.10和120.15；（6）出峰时间21.266分钟，异佛尔酮，质荷比54.05、82.10和138.15；（7）出峰时间22.239分钟，4-氧代异氟尔酮，质荷比68.00、96.05和152.10；（8）出峰时间24.096分钟，藏花醛，质荷比91.10、107.10、121.15和150.15；（9）出峰时间25.048分钟，4-（亚甲基异佛尔酮），质荷比91.05、107.10和150.15；（10）出峰时间27.662分钟，壬酸，质荷比60.00、73.05和115.10；（11）出峰时间30.408分钟，2,4,7,9-四甲基-5-癸炔-4,7-二醇，质荷比109.10和151.15；作为栀子油的气相色谱-质谱的特征指纹图谱；

步骤（3）栀子油的鉴别：取市售栀子油或未知食用植物油按步骤（1）获得其挥发性成分的气相色谱-质谱谱图，利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对比栀子油的气相色谱-质谱的特征指纹图谱和市售栀子油或未知食用植物油的挥发性成分的气相色谱-质谱谱图，对11个栀子和栀子油的共同特征峰进行确认，按保留时间相差小于0.1min、质荷比相差小于0.05、相对峰面积大于0.5%为有效峰进行判别，11个共同特征峰出现9个确认为栀子油，少于9个确认为非栀子油；

步骤（1）中，气相色谱条件：色谱柱，DB-5MS毛细管柱30m×0.25mm×0.25μm；程序升温：40℃保持4 min，以6℃/min 的速度升温到70℃，保持8 min，以6℃/min 的速度升温到180℃，保持3min；进样口温度250℃；载气He，流速1mL/min；不分流，溶剂延迟4min；

步骤（1）中，质谱条件：EI离子源，电子能量70eV，扫描范围m/z50.00-500.00，离子源温度200℃，接口温度250℃。